[发明专利]一种他克莫司软膏的样品前处理方法

说明书

本发明公开了一种他克莫司软膏有关物质的检测方法，其中样品的前处理采用超临界流体萃取他克莫司有关物质，主要解决了现有技术他克莫司软膏有关物质提取不完全、步骤过于繁琐的问题。

发明领域

本发明属于医药产品检测领域，具体涉及一种他克莫司软膏有关物质的检测方法。

背景技术

对他克莫司软膏有关物质检测时，他克莫司有关物质的提取是检测的关键，现有技术中样品的前处理过程是采用固相萃取的方法得到供试品溶液，具体步骤：对固相萃取柱进行预处理，样品中加入正己烷-乙酸乙酯混悬，离心，取上清液过预处理的固相萃取柱；再向离心管中加入正己烷-乙酸乙酯混悬，离心，取上清液过预处理的固相萃取柱；用正己烷-乙酸乙酯洗涤固相萃取柱6次，保证每次冲洗完全；然后将固相萃取柱用乙酸乙酯洗脱两次，收集洗脱液，最后水浴蒸发至油状残留物，加入正己烷-正丁基氯-乙腈混合溶液溶解得到供试品溶液。上述处理繁琐不高效，操作人员会因为经验不足而导致他克莫司软膏中的有关物质提取不完全，有时一次有效提取长达一天，当前方法很难进行有效检测。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种他克莫司软膏有关物质的检测方法，其中样品的前处理采用超临界流体萃取他克莫司有关物质，主要解决了现有技术他克莫司软膏有关物质提取不完全、步骤过于繁琐的问题。

本发明的技术方案具体是这样实现的：

一种他克莫司软膏有关物质的检测方法，包括样品的前处理和他克莫司有关物质的检测，样品的前处理采用超临界流体萃取他克莫司有关物质；

所述超临界流体萃取的条件：所述超临界流体是二氧化碳，萃取温度为60℃-65℃，萃取压力为20MPa-35MPa，萃取时间 45min-60min，所述二氧化碳的流速是0.1L/min-0.8L/min。

优选地，所述超临界流体萃取的条件：所述超临界流体是二氧化碳，萃取温度为60℃-65℃，萃取压力为25MPa-30MPa，萃取时间60min，所述二氧化碳的流速是0.6L/min-0.8L/min。

其中所述样品的前处理的具体步骤包括：

取他克莫司软膏样品，用正己烷溶剂于60℃-65℃水浴溶解后，以20MPa-35MPa的压力喷射到萃取釜中，同时通入二氧化碳流体进行萃取，易溶于二氧化碳和正己烷中的成分从萃取釜顶部流入分离釜，不易溶于二氧化碳和正己烷中的成分残留在萃取釜中，连续循环萃取完成后，取残留在萃取釜中的成分采用正己烷-正丁基氯-乙腈溶剂溶解，即：供试品溶液。

所述他克莫司软膏中他克莫司的含量为0.1％w/w，基质为碳酸丙烯酯、白凡士林、矿物油、白蜡、石蜡。在样品前处理过程中所述不易溶于二氧化碳和正己烷中的成分包括他克莫司和碳酸丙烯酯残留在萃取釜中，易溶于二氧化碳和正己烷中的成分包括白凡士林、矿物油、白蜡、石蜡从萃取釜顶部流入分离釜，这样使得他克莫司有关物质完全分离出来。

所述正己烷-正丁基氯-乙腈的体积比为1:1:1。

所述他克莫司有关物质的检测采用国家药品监督管理局发布的进口药品他克莫司软膏注册标准(标准号：JX20130245)中公布的有关物质的测定法。

本发明所述他克莫司软膏有关物质的检测方法，其中样品的前处理采用超临界流体萃取他克莫司有关物质，提取完全、步骤简单，能够有效地提取他克莫司有关物质，进一步精准监控他克莫司软膏有关物质的含量，对他克莫司软膏的质量研究有重大作用。

附图说明

图1是所述他克莫司原料药的HPLC谱图；

图2是所述他克莫司软膏的空白辅料的HPLC谱图；

图3是实施例1所述他克莫司软膏有关物质的HPLC谱图；

图4是实施例2所述他克莫司软膏有关物质的HPLC谱图；