[发明专利]一种非结核分枝杆菌的冻干保护剂及其制备方法和保藏方法在审
| 申请号： | 202110619499.4 | 申请日： | 2021-06-03 |
| 公开（公告）号： | CN113122484A | 公开（公告）日： | 2021-07-16 |
| 发明（设计）人： | 孙苛苛;蔡克亚;赵高岭;刘美丽;陈静;封松利;牛亚静;李越峰;蔡艳婷 | 申请（专利权）人： | 郑州安图生物工程股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N1/04;C12R1/32 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 潘颖 |
| 地址： | 450016 河南省*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 结核 分枝杆菌 保护 及其 制备 方法 保藏 | ||
1.一种非结核分枝杆菌的冻干保护剂，其特征在于，包括如下组分：
2.根据权利要求1所述的冻干保护剂，其特征在于，包括如下组分：
3.根据权利要求1所述的冻干保护剂，其特征在于，包括如下组分：
4.权利要求1至3中任一项所述冻干保护剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将Middlebrook7H9肉汤基础干粉和脱脂奶粉溶于水中，灭菌，得到牛奶悬液；
待牛奶悬液的温度冷却至40～60℃，加入ADC增菌液、有机硅，混匀。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述灭菌的温度为113～121℃，时间为10～30min。
6.一种非结核分枝杆菌的保藏方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)在无菌条件下，将非结核分枝杆菌与权利要求1至3中任一项所述冻干保护剂混合，制备成菌悬液；
(2)菌悬液预冻后进行冷冻干燥，存放于-20℃或-20℃以下的环境中。
7.根据权利要求6所述的保藏方法，其特征在于，还包括步骤(3)：将保藏的非结核分枝杆菌复苏。
8.根据权利要求7所述的保藏方法，其特征在于，所述复苏为：在15～30℃、无菌条件下，将非结核分枝杆菌与水混合进行复溶，得到菌悬液；取菌悬液接种于分枝杆菌固体培养基平板上进行培养。
9.根据权利要求8所述的保藏方法，其特征在于，所述分枝杆菌固体培养基平板为Middlebrook7H10琼脂培养基平板。
10.根据权利要求6至9中任一项所述的保藏方法，其特征在于，步骤(1)中所述非结核分枝杆菌为对数期的非结核分枝杆菌。
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