[发明专利]一种清心莲子饮HPLC特征图谱的检测方法及该特征图谱的应用

权利要求书

1.一种清心莲子饮HPLC特征图谱的检测方法，该药物由黄芩2.18g、地骨皮2.18g、车前子2.18g、炙甘草2.18g，麦冬8.88g，去心莲子3.26g、茯苓3.26g、蜜炙黄芪3.26g、人参3.26g组成，其制备方法为：将配方量粉碎过10目筛，置电控温煎药壶，加水煎煮两次，第一次煎煮加15倍量水，浸泡30分钟后，先武火煮沸后再文火保持微沸20分钟，用200目筛网趁热过滤；第二次煎煮加10倍量水，先武火煮沸后再文火保持微沸20分钟，趁热用200目筛网滤过，合并滤液，即得，煎液60℃浓缩至60g,即得清心莲子饮对应实物，其特征在于，检测方法步骤为：

1)供试品溶液的制备：取清心莲子饮对应实物5g，精密称定，置25ml容量瓶中，加70％甲醇溶解至刻度，称定重量，超声处理30分钟，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取过滤液，即得；

2)对照品溶液的制备：精密称取适量黄芩苷对照品、汉黄芩苷对照品、汉黄芩素对照品、甘草苷对照品、甘草酸铵对照品、京尼平苷酸对照品，精密称定，加70％甲醇制成每1ml含黄芩苷300μg、汉黄芩苷160μg、汉黄芩素30μg、甘草苷50μg、甘草酸铵250μg、京尼平苷酸50μg的混合溶液，即得；

3)色谱条件与系统适应性试验：色谱柱：HSS T3，色谱柱规格：2.1*100mm,1.8μm；流动相：以0.1％磷酸溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱；所述梯度洗脱具体为：0～2min，95％A，5％B；2～8min，95％～79％A,5％～21％B；8～15min，79％A,21％B；15～22min，79％～68％A,21％～32％B；22～24min，68％A,32％B；24～35min，68％～56％A,32％～44％B；35～40min，56％～25％A,44％～75％B；40～50min，25％～95％A,75％～5％B；50～60min，95％A,5％B；流速：0.25ml/min；柱温：30℃；检测波长：237nm，276nm；理论板数按黄芩苷峰计算应不低于5000；

4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl，注入液相色谱仪，测定，即得京尼平苷酸、甘草苷，甘草酸铵、黄芩苷、汉黄芩苷，汉黄芩素的含量；

所述特征图谱检测方法所得的HPLC特征图谱中包含13个共有峰，其中在检测波长为237nm时，相对保留时间依次为：0.27、0.59、0.60、1、1.79、1.92；在检测波长为276nm时，相对保留时间依次为：0.58、0.62、1、1.10、1.12、1.15、1.21、1.82；经过指认的有6个共有峰，其中在检测波长为237nm时，指认峰为：京尼平苷酸、甘草苷，黄芩苷、甘草酸铵，相对保留时间依次为0.27、0.60、1.0、1.79；在检测波长为276nm时，指认峰为：黄芩苷、汉黄芩苷，汉黄芩素，相对保留时间依次为1.0、1.21、1.82。

2.根据权利要求1所述特征图谱的检测方法，其特征在于，所述检测方法可用于表征车前子、甘草、黄芩药味。