[发明专利]一种发热伴血小板减少综合征病毒株的分离方法在审
| 申请号： | 202110603537.7 | 申请日： | 2021-05-31 |
| 公开（公告）号： | CN113337477A | 公开（公告）日： | 2021-09-03 |
| 发明（设计）人： | 李家斌;殷俊;温萌;胡立芬;叶英;刘艳艳;程君;陈振;柳燕;马雪娇;卞婷婷 | 申请（专利权）人： | 李家斌 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00 |
| 代理公司： | 合肥铭辉知识产权代理事务所(普通合伙) 34212 | 代理人： | 张立荣 |
| 地址： | 230000 安*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 发热 血小板 减少 综合征 病毒 分离 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种发热伴血小板减少综合征病毒株的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将发热伴血小板减少综合征病毒感染Vero细胞，培养5-7天，待超过60％的细胞出现细胞病变效应后，收集细胞培养物上清液；
(2)使用0.22μm滤头于生物安全柜中过滤步骤(1)中收集的细胞培养物上清液；
(3)准备超速离心管，在超速离心管底部加入8ml的浓度为20％的蔗糖溶液，形成蔗糖垫层；
(4)沿着步骤(3)中的超速离心管管壁，在蔗糖垫层上慢慢加入步骤(2)中过滤得到的细胞培养物上清液30ml；
(5)将步骤(4)中的超速离心管在4℃的温度下离心，设置离心速度为40000g，离心时间为4h；
(6)离心结束后，倒置超速离心管，待试管内液体流干，弃掉离心后的上清液及蔗糖垫层，保留超速离心管底部的沉淀物，即得纯化的发热伴血小板减少综合征病毒株。
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