[发明专利]一种检测农药残留的胶体金卡及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种检测农药残留的胶体金卡及其制备方法和应用。所述胶体金卡包括底板和在底板上依次搭接的样品垫、金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜上设置有包被农药抗原的检测线和包被二抗的质控线，所述金结合垫含有胶体金标记的农药抗体、蔗糖、十二水合磷酸氢二钠、牛血清白蛋白、酪朊酸钠、海藻糖和聚乙二醇。所述胶体金卡中，金结合垫含有蔗糖、十二水合磷酸氢二钠、牛血清白蛋白、酪朊酸钠、海藻糖和聚乙二醇，能够有效保护抗原和抗体，消除茶水中茶多酚、黄酮类物质、色素和矿物质等对显色的影响，提高了胶体金卡的抗干扰性。

技术领域

本发明属于农药检测技术领域，涉及一种检测农药残留的胶体金卡及其制备方法和应用，尤其涉及一种检测茶叶中农药残留的胶体金卡及其制备方法和应用。

背景技术

农药具备病虫防治、去除杂草和调节植物生长的作用，在农业中被广泛应用，但农作物残留的农药对人体亦具有危害。中国人饮茶有着几千年的悠久历史，也是茶叶的出口大国，因此，茶叶中农药残备受重视。

目前，农药残留检测的主要手段仍然依赖液相色谱法、气相色谱法、液相色谱-串联质谱法、气相色谱-质谱法等大型现代分析仪器，这类仪器虽然检测灵敏度高，但仪器的价格昂贵，操作繁琐，且周期长，难以满足大批量样品或临时样品的适时快速检测，因此，人们致力于开发能够快速、准确、便捷、低成本低检测农药残留的方法。

CN101319997公开了适用于茶叶中农药残留快速检测的卡片及其检测方法，所述卡片由含有稳定剂的固定化酶片和显色片组成，操作简便，检测时间短，能够快速有效的鉴别出农药残留超标的茶叶，但准确性和抗干扰性较差。

CN105181949A公开了一种适用于茶叶中吡虫啉等3种氯代烟碱类农药多残留速测的异源竞争免疫层析金标试纸条，该试纸条包括衬板、样品垫、金标一抗结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫，金标一抗结合垫上包被有胶体金标记的吡虫啉类特异性小鼠单抗，硝酸纤维素膜上包被有用于异源竞争的氯噻啉或噻虫胺人工抗原的检测线和包被有兔抗鼠IgG的质控线，可快速检测茶叶中农药残留结果，但抗干扰性较差，显色易被茶叶中的茶多酚、黄酮类物质、色素或矿物质影响。

综上所述，提供一种抗干扰性强且可快速、准确检测茶叶中农药残留的方法，对于农药检测技术领域具有重要意义。

发明内容

针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供一种检测农药残留的胶体金卡及其制备方法和应用，所述胶体金卡能够直接检测各种茶水基质，不受或者少受基质干扰的影响，从而避免检测线不出线或出线弱的情况。

为达上述目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种检测农药残留的胶体金卡，所述胶体金卡包括底板和在底板上依次搭接的样品垫、金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜上设置有包被农药抗原的检测线和包被二抗的质控线，所述金结合垫含有胶体金标记的农药抗体、蔗糖、十二水合磷酸氢二钠、牛血清白蛋白、酪朊酸钠、海藻糖和聚乙二醇。

本发明中，在金结合垫中添加蔗糖、十二水合磷酸氢二钠、牛血清白蛋白、酪朊酸钠、海藻糖和聚乙二醇，可以避免茶叶中的茶多酚、黄酮类物质、色素和矿物质等复杂基质对于胶体金标记的农药抗体和农药抗原的影响，其中，蔗糖、海藻糖和聚乙二醇可以使胶体金标记的农药抗体保持一定的亲水性，避免了因抗体内部的疏水蛋白完全暴露，构象发生改变，进而造成抗体特异性结合能力下降，非特异性结合概率增加，检测结果出现假阳性的可能；十二水合磷酸氢二钠能维持整个体系的盐离子浓度，提升蛋白的溶解量，并促进抗原抗体特异性反应；牛血清白蛋白和酪元酸钠作为结合垫中的非特异性蛋白，能够保护胶体金标记的农药抗体的稳定性。