[发明专利]一种检测农药残留的胶体金卡及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种检测农药残留的胶体金卡，其特征在于，所述胶体金卡包括底板和在底板上依次搭接的样品垫、金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；

所述硝酸纤维素膜上设置有包被农药抗原的检测线和包被二抗的质控线；

所述金结合垫含有胶体金标记的农药抗体、蔗糖、十二水合磷酸氢二钠、牛血清白蛋白、酪朊酸钠、海藻糖和聚乙二醇。

2.根据权利要求1所述的胶体金卡，其特征在于，所述样品垫上含有三羟甲基氨基甲烷、牛血清白蛋白、脂肪醇聚氧乙烯、吐温和聚乙烯吡咯烷酮；

优选地，所述检测线上还含有氯化钠、海藻糖和聚氧乙烯十二烷基醚。

3.根据权利要求1或2所述的胶体金卡，其特征在于，所述农药抗体包括毒死蜱抗体、甲萘威抗体、三唑磷抗体、三唑酮抗体、涕灭威抗体、氟虫腈抗体、多效唑抗体、吡虫啉抗体、哒螨灵抗体或百菌清抗体中的任意一种；

优选地，所述农药抗体为鼠源农药IgG抗体；

优选地，所述农药抗原包括毒死蜱抗原、甲萘威抗原、三唑磷抗原、三唑酮抗原、涕灭威抗原、氟虫腈抗原、多效唑抗原、吡虫啉抗原、哒螨灵抗原或百菌清抗原中的任意一种；

优选地，所述二抗包括羊抗鼠IgG抗体或兔抗鼠IgG抗体。

4.一种如权利要求1-3任一项所述的检测农药残留的胶体金卡的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)使用含有氯化钠、海藻糖、聚氧乙烯和十二烷基醚的划膜液在硝酸纤维素膜进行划膜，制作检测线和质控线，并在检测线上包被农药抗原，在质控线上包被二抗，得到具有检测线和质控线的硝酸纤维素膜；

使用含有蔗糖、十二水合磷酸氢二钠、牛血清白蛋白、酪朊酸钠、海藻糖和聚乙二醇的金结合垫处理液浸泡玻璃纤维，进行干燥处理，并在玻璃纤维上喷涂胶体金标记的农药抗体，得到金结合垫；

使用含有三羟甲基氨基甲烷、牛血清白蛋白、脂肪醇聚氧乙烯、吐温和聚乙烯吡咯烷酮的样品垫处理液浸泡玻璃纤维，进行干燥处理，得到样品垫；

(2)将样品垫、金结合垫、具有检测线和质控线的硝酸纤维素膜和吸水垫依次搭接，并粘合在底板上，得到所述检测农药残留的胶体金卡。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述划膜液含有0.05～0.2M氯化钠、1％～5％海藻糖和0.02％～0.05％聚氧乙烯十二烷基醚；

优选地，步骤(1)所述金结合垫处理液含有2％～8％蔗糖、0.05～0.2M十二水合磷酸氢二钠、0.5％～5％牛血清白蛋白、0.5％～5％酪朊酸钠、1％～3％海藻糖和0.5％～3％聚乙二醇；

优选地，步骤(1)所述样品垫处理液含有0.02～0.2M三羟甲基氨基甲烷、0.5％～5％牛血清白蛋白、0.1％～1.5％脂肪醇聚氧乙烯、0.1％～1.5％吐温和0.25％～1.5％聚乙烯吡咯烷酮。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述搭接为重叠2～3mm。

7.根据权利要求4-6任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括制备胶体金溶液的步骤；

优选地，所述胶体金溶液的制备方法为使用柠檬酸三钠还原氯金酸制备胶体金溶液；

优选地，所述胶体金溶液中胶体金的粒径为35～45nm。

8.根据权利要求4-7任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括制备胶体金标记的农药抗体的步骤；

优选地，所述胶体金标记的农药抗体的制备方法为使用K₂CO₃溶液调节胶体金溶液pH，随后将胶体金溶液与农药抗体混合进行标记，得到胶体金标记的农药抗体；

优选地，所述K₂CO₃溶液的浓度为0.2～0.4M；

优选地，所述胶体金溶液和农药抗体的配比为1mL:(5～8)μg。