[发明专利]一种促软骨修复外泌体缓释微球的微流控制备方法、缓释微球及其应用

说明书

一种促软骨修复外泌体缓释微球的微流控制备方法一种促软骨修复外泌体缓释微球的微流控制备方法，步骤S1，制备获取微球溶液；步骤S2，制备获取微流控的流动相溶液；步骤S3，提取间充质干细胞分离获取外泌体溶液，经过净化处理后与步骤S1中所制备的微球溶液进行混合配置获取微流控的分散相溶液；步骤S4，通过将步骤S2取得的流动相溶液以及步骤S3取得的分散相溶液分别通过微流控芯片制备取得促软骨修复外泌体缓释微球，该促软骨修复外泌体缓释微球的微流控制备方法能够有效提升外泌体治疗骨关节炎的疗效，运用微流控芯片技术，获得相对于传统骨关节炎治疗更为长久可控且经济的疗效。

技术领域

本发明涉及生物材料技术领域，特别是涉及一种促软骨修复 外泌体缓释微球的微流控制备方法、缓释微球及其应用。

背景技术

骨关节炎是一组涉及退化关节的慢性关节炎性疾病，有高发病 率，高致残率，难治愈性的特点。随着世界人口老龄化和肥胖的 增加，骨关节炎的医疗服务需求将大幅度增加。但由于骨关节炎 病因和病理特征不明确的特殊性，如何选择有效的治疗措施成为 目前的一大难题。对于骨关节炎的治疗，2018版的专家共识中提 到，应采用(健康宣教、力量练习、物理疗法、中医治疗等)， 药物治疗，修复治疗和重建性治疗。基础治疗与药物治疗是早期 骨关节炎的首选治疗措施，但都只能帮助缓解症状，但不能阻止 疾病的发展。而随着疾病的进展，后期患侧关节骨质增生明显， 并伴有关节间隙重度的狭窄，关节畸形等，此时重建性治疗则成 为唯一的选择。但是长期的药物治疗和手术带来的副作用往往也 会加剧患者的痛苦，因此新的骨关节炎治疗手段亟待开发。

因此，针对现有技术不足，提供一种促软骨修复外泌体缓释微 球的微流控制备方法、缓释微球及其应用以克服现有技术不足甚 为必要。

发明内容

本发明的目的之一在于避免现有技术的不足之处而提供一种 促软骨修复外泌体缓释微球的微流控制备方法，该促软骨修复外 泌体缓释微球的微流控制备方法能够有效提升外泌体治疗骨关节 炎的疗效，运用微流控芯片技术，获得相对于传统骨关节炎治疗更为长久可控且经济的疗效。

本发明的上述目的通过如下技术手段实现。

提供一种促软骨修复外泌体缓释微球的微流控制备方法，步 骤S1，制备获取微球溶液；

步骤S2，制备获取微流控的流动相溶液；

步骤S3，提取间充质干细胞分离获取外泌体溶液，经过净化 处理后与步骤S1中所制备的微球溶液进行混合配置获取微流控的 分散相溶液；

步骤S4，通过将步骤S2取得的流动相溶液以及步骤S3取得 的分散相溶液分别通过微流控芯片制备取得促软骨修复外泌体缓 释微球。

具体的，上述步骤S1包含有；

步骤S1-1，分别称取甲基丙烯酸酰化明胶和聚乙二醇(二醇) 二丙烯酸酯，各加入到预热至T温度的双蒸水中分散，获得甲基 丙烯酸酰化明胶溶液和聚乙二醇(二醇)二丙烯酸酯溶液；

步骤S1-2，以摩尔等份计，A1等份的甲基丙烯酸酰化明胶溶 液和A2等份的聚乙二醇(二醇)二丙烯酸酯溶液充分搅拌至均匀 后，获得微球混合溶液；

步骤S1-3，将微球混合溶液经过纳米滤膜过滤除菌后静置获 取微球溶液。

具体的，上述步骤S2具体为；以体积等份计，将B1体积的 司班80加入到B2体积的矿物油中搅拌均匀，静置获取流动相溶 液。

进一步的，在步骤S3包含有；

步骤S3-1，选取处于对数生长期的间充质干细胞，当间充质 干细胞生长至C1融合度时，更换含无外泌体血清的培养基，继续 培养H小时；

步骤S3-2，收集培养基中的细胞培养上清，采用差速离心法 提取外泌体溶液；