[发明专利]一种三联卵黄抗体冻干粉及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种三联卵黄抗体冻干粉及其制备方法和应用，属于兽药技术领域。本发明所提供的三联卵黄抗体冻干粉在‑20℃条件下保存6个月，抗体效价基本无变化。所提供的制备方法，成本低，操作流程简便，相对于其他方法更易去除卵黄液的脂肪和其他杂质，且对卵黄液中的卵黄抗体效价影响最小。

技术领域

本发明属于兽药技术领域，具体涉及一种三联卵黄抗体冻干粉及其制备方法和应用。

背景技术

中国规模化养猪业的快速发展伴随越来越多和越来越复杂的疫病发生。近几年，以猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastro-enteritis virus,TGEV)，猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)和伪狂犬病毒(porcinepseudorabies virus,PRV)为代表成为引起规模猪场仔猪顽固性腹泻的主要病原，给养殖户造成了巨大的经济损失。疫苗接种是防控三种疫病的主要措施。

卵黄抗体液(IgY)是无残留、无毒副作用的免疫球蛋白，广泛用于疫病的预防和治疗。规模猪场各种原因导致的免疫失败而继发引起仔猪腹泻的报道较多，为针对仔猪腹泻主要病原的卵黄抗体产品提供了市场空间。卵黄抗体的生产成本低、易制备、针对性强、疗效好的特点使其广受养殖场技术人员的欢迎，但常规卵黄抗体产品多以水溶剂方式生产和使用，不便于保存和运输，局限了各类卵黄抗体产品的推广应用。

发明内容

有鉴于此，本发明目的之一在于提供一种三联卵黄抗体冻干粉，本发明目的之二在于提供一种三联卵黄抗体冻干粉的制备方法。为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1、一种三联卵黄抗体冻干粉，所述冻干粉由冻干保护剂和三联卵黄抗体组成，质量体积比为1:1.5～2，g：mL，所述冻干保护剂由质量百分比为1.5％明胶、0.5％蔗糖、1％胰蛋白胨、0.5％聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、2％海藻糖及0.5％果胶组成。

作为优选的技术方案之一，所述三联卵黄抗体冻干粉在-20℃条件下的保存时间为6个月。

2、所述三联卵黄抗体冻干粉的制备方法，所述方法为：

a、用3mL猪传染性胃肠炎病毒、2mL伪狂犬病毒和3mL猪流行性腹泻病毒的弱毒株抗原，按照先后顺序经颈部皮下免疫140日龄产蛋鸡，每次免疫间隔7天，每种抗原免疫4次，收集免疫鸡蛋，分离蛋黄蛋清，加入PEG-6000，静置、离心沉淀，重复一次，取上清，得到三联卵黄抗体液。

b、将冻干保护剂按1:1.5～2的质量体积比添加到三联卵黄液中，混匀，-20℃预冻4小时，-80℃预冻12小时，真空冷冻干燥30h。

本发明的有益效果在于：

本发明提供了一种抗猪PRV-TGEV-PEDV三联卵黄抗体冻干粉的制备方法，此方法所制备的三联卵黄抗体在-20℃条件下保存6个月，抗体效价基本无变化。本发明所提供的方法，制备成本低，操作流程简便，相对于其他方法更易去除卵黄液的脂肪和其他杂质，且对卵黄液中的卵黄抗体效价影响最小。

附图说明

图1为不同温度、不同保存时间对抗猪PRV-TGEV-PEDV三联卵黄抗体冻干粉猪伪狂犬卵黄抗体效价动态变化曲线。

具体实施方式

以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，以下实施例中所用伪狂犬病活疫苗(Bartha-K61株)，购于武汉中博生物股份有限公司；抗猪伪狂犬病毒-猪传染性胃肠炎病毒-猪流行性腹泻病毒三联卵抗体液，由本实验室提供；聚乙二醇(PEG6000)、聚乙烯吡咯烷酮、硫柳汞钠，购于国药集团化学试剂有限公司。FD-1B-5D冷冻干燥机，北京博医康实验仪器有限公司生产，重庆奥龙生物技术有限公司提供。猪传染性胃肠炎抗原(弱毒株)、猪流行性腹泻抗原(弱毒株)均由重庆奥龙生物技术有限公司惠赠

实施例1