[发明专利]牛筋草EPSPS蛋白胶体金检测试纸及其应用

权利要求书

1.牛筋草EPSPS蛋白胶体金检测试纸，其特征在于，所述检测试纸由样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和背板组成；样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次相互叠加粘贴在背板上，各部分之间相互叠加2-3mm；金标垫上包被有胶体金标记的抗牛筋草EPSPS蛋白单克隆抗体；硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线，所述检测线包被有抗牛筋草EPSPS蛋白单克隆抗体，所述质控线包被有抗鼠IgG二抗；

其中，所述抗牛筋草EPSPS蛋白单克隆抗体由保藏编号为CGMCC No.22308的杂交瘤细胞株FL-374-08分泌产生。

2.根据权利要求1所述的检测试纸，其特征在于，所述样品垫为玻璃纤维素膜。

3.根据权利要求1所述的检测试纸，其特征在于，所述胶体金标记的抗牛筋草EPSPS蛋白单克隆抗体的制备方法包括：

取120mL胶体金溶液，加入0.1M的K₂CO₃溶液2400μL，搅拌5min后，加入1600μg抗牛筋草EPSPS蛋白单克隆抗体，混合均匀，室温反应40min；加入终浓度为0.1％的BSA，静置30min；4℃，9000rpm离心20分钟，弃上清，沉淀用4mL复溶液复溶，即得；所述复溶液为：含1％BSA、5％蔗糖和5％吐温-20的10mM PBS液；

所述胶体金溶液的配制方法包括：取超纯水99mL于烧杯中，加入1％氯金酸储存液1mL，置于恒温磁力搅拌器上搅拌混匀，加热至溶液沸腾，迅速加入现制备的柠檬酸三钠水溶液2.2mL，继续搅拌加热，溶液沸煮出现透明的橙红色后，继续沸煮15-20min，自然冷却至室温，加超纯水定容；倒入棕色瓶，4℃避光保存；其中，柠檬酸三钠水溶液的配制方法包括：将1g柠檬酸三钠溶解于99mL超纯水中，混匀即得。

4.根据权利要求3所述的检测试纸，其特征在于，金标垫上包被的胶体金标记的抗牛筋草EPSPS蛋白单克隆抗体的浓度为0.4mg/mL。

5.根据权利要求1所述的检测试纸，其特征在于，所述检测线包被的抗牛筋草EPSPS蛋白单克隆抗体的浓度为0.5-1.5mg/mL。

6.根据权利要求1所述的检测试纸，其特征在于，所述背板为PVC板。

7.根据权利要求1-6任一项所述的检测试纸，其特征在于，所述样品垫的大小为4mm×15mm，金标垫的大小为3mm×4mm，硝酸纤维素膜的大小为4mm×28mm，吸水垫的大小为4mm×19mm。

8.根据权利要求7所述的检测试纸，其特征在于，所述检测线与质控线之间的间距为6-6.5mm。

9.权利要求1-8任一项所述检测试纸在牛筋草EPSPS蛋白检测中的应用。