[发明专利]通过反复染色和脱色检测细胞的方法

权利要求书

1.用于通过提供具有通式(I)的缀合物来检测生物样本的样品中的靶部分的方法，

其中Ar、MU和L1作为聚合物的重复单元，

Ar是芳基或杂芳基，

MU是沿着聚合物主链均匀或随机分布的聚合物修饰单元或带隙修饰单元，

L1是沿着聚合物均匀或随机分布的芳基或杂芳基，

L2是定位于聚合物的端部上的芳基或杂芳基，

FL是荧光部分，

G1和G2代表氢、卤素或抗原识别部分，条件是G1或G2中的至少一个是抗原识别部分，

和

a是10至100摩尔%，

b是0.1至50摩尔%，

c是0至90摩尔%，

d是1至10,000，

条件是a + b + c = 100摩尔%，

其特征在于

a)使生物样本的样品与至少一种缀合物(I)接触，从而用缀合物(I)标记被抗原识别部分识别的靶部分；

b)用波长在荧光部分FL的吸收光谱内的光来激发标记的靶部分；

c)通过检测由荧光部分FL发出的荧光辐射来检测标记的靶部分，和

d)通过用波长在荧光部分FL的吸收光谱内的光，将缀合物照射足以传递足够能量的时间，使标记的靶部分的荧光部分FL降解，所述能量使由荧光部分FL发出的荧光辐射至少降低了初始荧光辐射的75%。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于Ar是由非离子侧链取代的芳基或杂芳基重复单元，所述非离子侧链选自乙二醇寡聚物侧链、右旋糖酐或甘油。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于MU是沿着聚合物主链均匀或随机分布的聚合物修饰单元或带隙修饰单元，并且由选自以下的一个或多个任选取代的取代基任选取代：卤素、羟基、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₁₂烯烃、C₂-C₁₂炔烃、C₃-C₁₂环烷基、C₁-C₁₂卤代烷基、C₁-C₁₂烷氧基、C₂-C₁₈ (杂)芳氧基、C₂-C₁₈ (杂)芳基氨基、C₂-C₁₈ (杂)芳基和(CH₂)x’、(OCH₂CH₂)y’OCH₃，其中x’独立地为0-20的整数，并且y’独立地为0至50的整数。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征在于L1是沿着聚合物主链均匀或随机分布的芳基或杂芳基，并且由一个或多个侧基链取代，所述侧基链由以下封端：i)用于缀合至分子或生物分子，选自胺、氨基甲酸酯、羧酸、羧酸酯、马来酰亚胺、活化酯、N-羟基琥珀酰亚胺基、肼、酰肼、肼、叠氮化物、炔烃、醛、硫醇及其保护基团的官能团；或ii)作为受体染料的附着的缀合的有机染料，或iii)生物分子。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于L2是定位于聚合物主链的端部上的芳基或杂芳基，并且由一个或多个侧基链取代，所述侧基链由以下封端：i)用于缀合至分子或生物分子，选自胺、氨基甲酸酯、羧酸、羧酸酯、马来酰亚胺、活化酯、N-羟基琥珀酰亚胺基、肼、酰肼、肼、叠氮化物、炔烃、醛、硫醇及其保护基团的官能团；或ii)作为受体染料的附着的有机染料，或iii)生物分子。