[发明专利]一种吗啡免疫荧光层析快检试纸条、制备方法及其检测方法

权利要求书

1.一种吗啡免疫荧光层析快检试纸条，其特征在于：包括样品垫、结合垫、NC膜、吸水纸和胶板，所述的结合垫的制备方法包括以下步骤：

(1)将结合垫置于结合垫浸泡液中浸泡2小时，取出浸泡好的结合垫置于烘箱中在45下烘干2小时备用；

(2)荧光微球的活化步骤：取荧光微球超声5分钟，取超声好的荧光微球100微升加1ml0.05mol/LMES(PH＝5.0)溶液混合均匀，离心13000r/min、20min、弃上清液，再加1ml0.05mol/LMES混合均匀超声5分钟，离心13000r/min、20min，弃上清液，加200微升0.05mol/LMES溶液混合均匀、超声5分钟，用0.05mol/LMES溶液配制NHS10mg/ml，取15微升加入超声好的荧光微球中，再用纯水配制EDC15mg/ml取2微升加入到上述荧光微球中，用锡箔纸包裹避光摇床反应15分钟；

(3)荧光微球与吗啡抗体偶联物的制备：取100微升每毫克的吗啡抗体20微升加入活化后的荧光微球中混合均匀，避光摇床反应2h，加入10微升0.1mol/L的乙醇胺溶液混合均匀，避光摇床反应30min后离心13000r/min、10min，弃上清夜，用500微升微球稀释液(0.01mol/LPBS+1％BSA)混合均匀，超声5分钟，避光摇床反应1h，离心13000r/min、10min,弃上清液，用200微升的微球稀释液混合均匀、超声5min.在2～8度下保存；

(4)取出微球吗啡抗体偶联物超声5分钟，取超声好的微球抗体偶联物1微升加入100微升的喷金稀释液配制成喷金混合液，将稀释好的喷金混合液再次超声5分钟让微球抗体偶联物充分的混合均匀，并防止微球抗体偶联物的聚集，取出超声好的喷金混合液，采用XYZ三维喷金划线仪，以1微升每厘米的速度在处理好的结合垫上进行喷金，将喷金后的结合垫置于烘箱中在45度下烘干1小时备用。

2.根据权利要求1所述的一种吗啡免疫荧光层析快检试纸条，其特征在于：所的结合垫浸泡液为PH＝7.4的0.05mol/L的Tris-HCL缓冲溶液，其中包含5％的海藻糖、0.5％BSA、0.1％Tween。

3.根据权利要求1所述的一种吗啡免疫荧光层析快检试纸条，其特征在于：所述的喷金稀释液配方：30mmol/lPBS、0.05％PEG20000、1％BSA、0.01％SDS、10％蔗糖、3％吐温。

4.根据权利要求1所述的一种吗啡免疫荧光层析快检试纸条，其特征在于：所述的样品垫为CB06、SB06、RB45、KB50、SB08，所述的结合垫为VL98、VL78、SAP-Z70，所述的NC膜为JJ140、CN140，所述的吸水纸为CH37、SH27、CH27、SH37，所述的胶板为PVC、SM31-40、SMNF31-40、SMA31-40。

5.根据权利要求4所述的一种吗啡免疫荧光层析快检试纸条，其特征在于：所述的样品垫为SB06，所述的结合垫为SAP-Z70，所述的NC膜为JJ140，所述的吸水纸为CH37，所述的胶板为PVC。