[发明专利]脂联素改造的胰岛细胞在改善或提高胰岛移植效果中的应用

说明书

本发明涉及生物医药领域，特别涉及脂联素改造使胰岛细胞具有抗氧化和/或抗炎症的特性，及胰岛细胞脂联素改造在改善或提高同种胰岛移植效果中的应用。本发明在胰岛移植前对胰岛细胞进行脂联素改造，使其过表达脂联素，并具有抗氧化和抗炎症的特性，提高了同种胰岛移植的结果。在基因治疗的过程中，将胰岛细胞分解成单个细胞，大大提高了病毒的感染效率。基因治疗后，将单细胞重新被养成具有功能的细胞团，使胰岛功能得到了极大的保留。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，特别涉及脂联素改造在胰岛细胞抗氧化和/或 抗炎症中的应用，及胰岛细胞脂联素改造在改善或提高胰岛移植效果中的应 用。

背景技术

胰岛移植被认为是有望治疗1型糖尿病(T1DM)的方法。然而，移植手 术后短期内严重的胰岛数量和功能缺失限制了其广泛应用。即使在同种(自 体)胰岛移植这样没有免疫排斥的情况下，也有多达60％的植入胰岛被很快 的破坏，强调了非免疫因素对调控胰岛移植结果的关键作用。在移植后的早 期阶段，胰岛分离纯化及缺血-再灌注所引起的的活性氧自由基和炎症反应被 认为是造成移植早期胰岛损失的主要原因。因此，在胰岛移植前，对胰岛进 行一定的基因改造，使其具有抗氧化和抗炎的特性非常重要。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了脂联素改造在胰岛细胞抗氧化和/或抗炎症中的 应用，及胰岛细胞脂联素改造在改善或提高同种胰岛移植效果中的应用。本 发明采用腺病毒介导的基因治疗系统，在胰岛移植前对胰岛细胞进行脂联素 基因改造，使其过表达脂联素并具有抗氧化和抗炎的特性。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了脂联素在改善或提高胰岛移植效果中的应用。脂联素(Adiponectin)是一种由脂肪细胞产生和分泌的生物活性多肽。

本发明还提供了脂联素改造在胰岛细胞抗氧化和/或抗炎症中的应用

更重要的是，本发明还提供了胰岛细胞脂联素改造在改善或提高同种胰 岛移植效果中的应用。

在本发明的一些具体实施方案中，所述脂联素改造的胰岛细胞为胰岛素 细胞过表达脂联素。

在本发明的一些具体实施方案中，基于腺病毒介导。

本发明还提供了使胰岛细胞具有抗氧化和/或抗炎症的特性，改善或提高 同种胰岛移植效果的方法，包括如下步骤：

步骤1：制备分散的胰岛细胞；

步骤2：经腺病毒介导，取所述胰岛细胞经脂联素改造，获得脂联素改造 的胰岛细胞；

步骤3：取所述脂联素改造的胰岛细胞，清洗，培养，获得胰岛团。

在本发明的一些具体实施方案中，步骤1中制备分散的胰岛细胞采用 0.25％的Trypsin-EDTA溶液处理。

在本发明的一些具体实施方案中，步骤2中所述胰岛细胞经Ad-APN-GFP 处理。

在本发明的一些具体实施方案中，步骤3中所述清洗为采用HBSS溶液 清洗2次。

在本发明的一些具体实施方案中，步骤3中所述培养为将所述脂联素改 造的胰岛细胞以1×10⁵/ml的细胞浓度接种于无粘性培养载体中，在 RPMI-1640培养基中培养4天，直至类胰岛团形成。

本发明在胰岛移植前对胰岛细胞进行脂联素改造，使其过表达脂联素， 并具有抗氧化和抗炎症的特性，提高了同种胰岛移植的结果。在基因治疗的 过程中，将胰岛细胞分解成单个细胞，大大提高了病毒的感染效率。基因治 疗后，将单细胞重新被养成具有功能的细胞团，是胰岛功能得到了极大的保 留。

附图说明