[发明专利]红细胞膜碎片冻干保护液和冻干方法及应用在审
申请号: | 202110568806.0 | 申请日: | 2021-05-25 |
公开(公告)号: | CN113016775A | 公开(公告)日: | 2021-06-25 |
发明(设计)人: | 庞伟;王丽;王秀柱;黄志刚;王伟权 | 申请(专利权)人: | 天津德祥生物技术有限公司 |
主分类号: | A01N1/00 | 分类号: | A01N1/00;G01N33/80 |
代理公司: | 北京中济纬天专利代理有限公司 11429 | 代理人: | 王俊 |
地址: | 300462 天津市滨海*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞膜 碎片 保护 方法 应用 | ||
1.红细胞膜碎片冻干保护液,包括:10mM-20mM的葡萄糖、6mM-12mM的乳糖、121mM-141mM的海藻糖、29mM-39mM的NaCl、4.3mM-5.3mM的KCl、0.115mM-0.125mM的KH2PO4和0.6mM-1.2mM的Na2HPO4。
2.如权利要求1所述的红细胞膜碎片冻干保护液,其包括:
20mM的葡萄糖、10mM的乳糖、140mM的海藻糖、39mM的NaCl、5.3mM的KCl、0.125mM的KH2PO4和1.2mM的Na2HPO4;
10mM的葡萄糖、12mM的乳糖、141mM的海藻糖、31mM的NaCl、4.3mM的KCl、0.115mM的KH2PO4和1.1mM的Na2HPO4;或者
15mM的葡萄糖、10mM的乳糖、131mM的海藻糖、35mM的NaCl、5.0mM的KCl、0.115mM的KH2PO4和1.1mM的Na2HPO4。
3.冻干红细胞膜碎片的方法,包括:
1) 制备新鲜红细胞膜碎片;以及
2) 将所述新鲜红细胞膜碎片与权利要求1或2所述的红细胞膜碎片冻干保护液混合后进行冻干处理。
4.如权利要求3所述的方法,其中步骤2)包括:
i) 将所述新鲜红细胞膜碎片与所述红细胞膜碎片冻干保护液混合,将所得的混合物置于4摄氏度至-20摄氏度的温度下预冷,接着进一步降温使其冻结;以及
ii) 对冻结的所述混合物进行冻干处理。
5.如权利要求4所述的方法,其中步骤i)中所述预冷在-20摄氏度下进行30分钟。
6.如权利要求4所述的方法,其中步骤i)中所述降温为以10摄氏度/分钟的速率降至-70摄氏度,所述冻结在-70摄氏度进行2小时以上。
7.如权利要求3或4所述的方法,其中所述新鲜红细胞膜碎片与所述红细胞膜碎片冻干保护液以体积比1:9混合。
8.如权利要求3或4所述的方法,其中步骤ii)中所述冻干处理包括一次干燥和二次干燥,在所述一次干燥过程中让冻干机的隔板温度和压力分别保持在-50摄氏度和2-4帕,处理时间18小时;在所述二次干燥过程中让冻干机的隔板温度和压力分别保持在20摄氏度和2-4帕,处理时间为10小时。
9.通过权利要求3-8任一项所述的方法制备的冻干红细胞膜碎片。
10.权利要求9所述的冻干红细胞膜碎片在血型反定型检测中的应用。
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