[发明专利]一种配合面部线雕的自体胶原蛋白组织填充物

说明书

本发明涉及一种配合面部线雕的自体胶原蛋白组织填充物，属于医学美容技术领域。本发明所述自体胶原蛋白组织填充物的原料包括胶原蛋白液、透明质酸凝胶、林格氏液和葡萄糖液；所述胶原蛋白液、透明质酸凝胶、林格氏液和葡萄糖液的体积比为1:2～10:1～2:1～2。该技术方案采用自体胶原蛋白组织填充物填充到皱纹底部，从而提高面部线雕环节蛋白质线和皮下细胞的附着效果，降低排异反应，并且透明质酸凝胶和自体胶原蛋白也为皮下细胞生长提供充足营养，在皮下细胞生长过程中作为粘附的骨架材料，在细胞生长成型后透明质酸凝胶和自体胶原蛋白也逐步降解，组织相容性好。

本申请为申请号为“201810930857.1”、发明名称为“一种配合面部线雕的自体胶原蛋白组织填充物的制备方法”的中国专利申请的分案申请，母案申请日为2018.08.15。

技术领域

本发明涉及一种配合面部线雕的自体胶原蛋白组织填充物的制备方法，属于医学美容技术领域。

背景技术

面部线雕是一种新型的医学美容方法，也叫蛋白线面部提升，是在皮肤内插入特殊蛋白美容线，同时刺激皮肤和筋膜层，使已经僵硬或下垂的肌肉组织重新进行排列，从而再造美丽面孔的最新微创手术方法。手术部位称为SMAS层，位于皮下脂肪与肌肉之间，连接皮肤与肌肉的皮肤特殊层。该层由于老化与皮肤一起下垂，通过对这些部位的刺激，提升改善皱纹。

皱纹是指皮肤受到外界环境影响，形成游离自由基，自由基破坏正常细胞膜组织内的胶原蛋白、活性物质，氧化细胞而形成的小细纹、皱纹。皱纹的发生归结起来有4个原因：自然老化、地心引力作用、阳光中紫外线照射使皮肤发生光老化与光损伤和面部表情肌过多的收缩。其中面部表情肌过多的收缩产生的皱纹称动力性皱纹，主要表现为眶外侧的鱼尾纹，额头纹和眉间纹、鼻唇沟纹和唇上纹和颈阔肌纹。除皱有许许多多的办法，局部外用各种各样的除皱霜、抗皱霜、防晒霜只能改善外观，它对皱纹的消除不会有较大的作用。医用胶原注射充填术有效，但因为是非自身物质，只能存在几个月就会被机体清除，同时注射后会有一定的过敏反应。

胶原蛋白是细胞外基质的主要成分，约占胶原纤维固体物的85％，占动物体内蛋白质总量的25％～30％，它广泛存在于动物的结缔组织(骨、软骨、皮肤、腱、韧等)中，对机体和脏器起着支持、保护、结合，以及形成界隔等作用。人体皮肤下层也有致密排布的胶原蛋白存在，皮肤的厚度和成分会随着年龄增加而改变，老年人的皮肤很容易受伤，且不易愈合，这很可能是因为上层皮肤成纤维细胞缺失所致，若能刺激这些细胞生长，就有可能恢复皮肤的弹性，同样还能刺激毛囊形成，减少疤痕。通过自体胶原蛋白注射的方式去除皱纹，能够显著减少过敏反应，但是单纯的胶原蛋白注射容易被机体降解，不能根本性的解决皱纹问题，为此，对现有的医用胶原注射填充物进行改进，对提高提高对皱纹的去除效果具有重要意义。

发明内容

为解决现有技术中存在的问题，本发明提供了一种自体胶原蛋白组织填充物的制备方法，利用透明质酸制成凝胶产品，然后和自体胶原蛋白组合形成组织填充物。具体技术方案如下：

一种配合面部线雕的自体胶原蛋白组织填充物的制备方法，包括以下步骤：

步骤一，获取自体成纤维组织，用D-Hanks缓冲液清洗，去除残留的血液和组织碎片，将自体成纤维组织剪成小块，加入消化液，放入37℃恒温震荡箱中消化20min～60min，然后静置待其分层后，吸取上层成纤维细胞液，移入含有胎牛血清的DMEM培养基中，密封离心分离，去除上清液，再次加入适量含有胎牛血清的DMEM培养基，吹打细胞制成成纤维细胞悬液，接种到培养瓶中，在37℃温度条件下，5％CO₂恒温培养，定期更换培养基直到成纤维细胞铺满培养瓶底部；

步骤二，传代培养，将步骤一得到的成纤维细胞从培养基中取出，加入D-Hanks缓冲液清洗干净，然后加入酶液消化处理，在成纤维细胞长到80％～90％融合后传代培养；

步骤三，胶原蛋白积累，在成纤维细胞生长三代后，将成纤维细胞放入无血清培养基，在37℃无血清培养基中培养，使成纤维细胞分泌出胶原蛋白；