[发明专利]桃核承气汤特征图谱的构建方法

权利要求书

1.一种桃核承气汤特征图谱的构建方法，其特征在于，包括：

（1）分别取没食子酸对照品、儿茶素对照品、苦杏仁苷对照品、表儿茶素没食子酸酯对照品、甘草苷对照品、芹糖甘草苷对照品、桂皮醛对照品、肉桂酸对照品、大黄酚-1-O-葡萄糖苷对照品、大黄酚-8-O-葡萄糖苷对照品、大黄素-8-O-葡萄糖苷对照品、大黄酸对照品、甘草酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品适量，加入溶剂溶解或提取，制得对照品溶液；

（2）取桃核承气汤，加提取溶剂提取，制得供试品溶液；所述提取溶剂为20~70%甲醇；

（3）取预设量的对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪的色谱柱为Waters CORTECS T3柱，其柱长为150mm，内径为2.1mm，粒径为1.6μm；所述液相色谱仪以甲醇为流动相A，0.15%~0.25%磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，建立桃核承气汤的特征图谱；

其中，所述梯度洗脱按下述程序进行：

0~5min，流动相A从1%→8%，流动相B从99%→92%；

5~21min，流动相A从8%→23%，流动相B从92%→77%；

21~35min，流动相A从23%→31%，流动相B从77%→69%；

35~45min，流动相A从31%→55%，流动相B从69%→45%；

45~51min，流动相A从55%→65%，流动相B从45%→35%；

51~56min，流动相A从65%→83%，流动相B从35%→17%；

56~65min，流动相A从83%→100%，流动相B从17%→0%；

其中，检测时间为0~30分钟时，检测波长为220nm；检测时间为30~45分钟时，检测波长为290nm，检测时间为45~65分钟时，检测波长为260nm。

2.如权利要求1所述的桃核承气汤特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤（3）中，分别吸取对照品溶液和供试品溶液各1~3μL，注入液相色谱仪进行检测；其中，所述色谱柱的柱温为30~38℃；所述液相色谱仪以甲醇为流动相A，以0.15%~0.25%的磷酸水溶液为流动相B，流速为0.25~0.36mL/min。

3.如权利要求1所述的桃核承气汤特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤（3）中，分别吸取对照品溶液和供试品溶液各1μL，注入液相色谱仪进行检测，其中，所述液相色谱仪的色谱柱的柱温为38℃；所述液相色谱仪以甲醇为流动相A，以0.2%的磷酸水溶液为流动相B，流速为0.3mL/min。

4.如权利要求1所述的桃核承气汤特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤（1）中，分别取没食子酸对照品、儿茶素对照品、苦杏仁苷对照品、表儿茶素没食子酸酯对照品、甘草苷对照品、芹糖甘草苷对照品、桂皮醛对照品、肉桂酸对照品、大黄酚-1-O-葡萄糖苷对照品、大黄酚-8-O-葡萄糖苷对照品、大黄素-8-O-葡萄糖苷对照品、大黄酸对照品、甘草酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品适量，分别加甲醇制成每1mL含没食子酸15μg、儿茶素100μg、苦杏仁苷30μg、表儿茶素没食子酸酯50μg、甘草苷30μg、芹糖甘草苷70μg、桂皮醛10μg、肉桂酸10μg、大黄酚-1-O-葡萄糖苷30μg、大黄酚-8-O-葡萄糖苷40μg、大黄素-8-O-葡萄糖苷50μg、大黄酸20μg、甘草酸100μg、大黄素10μg、大黄酚10μg的溶液，即得对照品溶液。

5.如权利要求1所述的桃核承气汤特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤（2）中，提取时间为10~30min，提取方式为超声提取。

6.如权利要求1所述的桃核承气汤特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤（2）包括：

取桃核承气汤冻干粉0.15~0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70%甲醇10mL，称定重量，分别取出，采用功率为200~300W，频率为40~50kHz的超声波处理20min，取出，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。