[发明专利]一种NSC668394在制备提高猪精子授精能力的试剂中的应用有效
| 申请号： | 202110543785.7 | 申请日： | 2021-05-19 |
| 公开（公告）号： | CN113373110B | 公开（公告）日： | 2023-05-26 |
| 发明（设计）人： | 吴珍芳;洪林君;徐志谦;谢言射;吴昌华;蔡更元;李紫聪;顾婷;杨杰;杨化强;郑恩琴;徐铮;黄思秀 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/076 | 分类号： | C12N5/076 |
| 代理公司： | 佛山市君创知识产权代理事务所(普通合伙) 44675 | 代理人： | 许菲菲 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 nsc668394 制备 提高 精子 授精 能力 试剂 中的 应用 | ||
1.一种NSC668394在制备体外提高猪精子授精能力的试剂中的应用，其特征在于：
所述的提高猪精子授精能力的试剂为含BSA和苯甲酸钠咖啡因的猪精子获能液和NSC668394的混合物；其中，所述的NSC668394的终浓度为30μM；
所述的含BSA和苯甲酸钠咖啡因的猪精子获能液包含如下组分：KCl 0.224g/L，CaCl2·2H2O 1.102g/L，NaCl 6.611g/L，Tris 2.324g/L，D-葡萄糖 1.982g/L，丙酮酸钠0.550g/L，BSA 2g/L，苯甲酸钠咖啡因0.68g/L。
2.一种体外提高猪精子授精能力的试剂，其特征在于为含BSA和苯甲酸钠咖啡因的猪精子获能液和NSC668394的混合物；
所述的NSC668394的终浓度为30μM；
所述的含BSA和苯甲酸钠咖啡因的猪精子获能液包含如下组分：KCl 0.224g/L，CaCl2·2H2O 1.102g/L，NaCl 6.611g/L，Tris 2.324g/L，D-葡萄糖 1.982g/L，丙酮酸钠0.550g/L，BSA 2g/L，苯甲酸钠咖啡因0.68g/L。
3.一种体外提高猪精子授精能力的方法，其特征在于包含如下步骤：
（1）收集猪精液，离心，弃上清，得到精子沉淀；
（2）将步骤（1）制得的精子沉淀用洗精液重悬并洗涤，然后再将精子沉淀置于含BSA和苯甲酸钠咖啡因的猪精子获能液中洗涤；
（3）经过步骤（2）洗涤后将精子沉淀再次重悬于含BSA和苯甲酸钠咖啡因的猪精子获能液中，并在该体系中加入终浓度为30μM的NSC668394处理精子，所述的处理时间为3h。
4.根据权利要求3所述的体外提高猪精子授精能力的方法，其特征在于：
步骤（1）中所述的猪精液为采精量大于100ml、精子密度大于2×108/mL、精子活力在65%以上和形态正常大于80%的猪精液样品。
5.根据权利要求3所述的体外提高猪精子授精能力的方法，其特征在于：
步骤（2）中所述的洗精液为含1g/L BSA的PBS。
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