[发明专利]负载组织因子及二氧化硅的胶原蛋白水凝胶止血敷料

权利要求书

1.一种由负载组织因子及二氧化硅的胶原蛋白体系构建的止血敷料的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

(1)将携带有组织因子基因的质粒转入细菌细胞中，在细菌中表达提纯，得到纯化后的组织因子。

(2)将磷脂超声后加入步骤(1)得到的组织因子和生物珠之后充分振荡，使组织因子与磷脂囊泡形成结合体。

(3)将提纯后的胶原蛋白配制成不同浓度的胶原蛋白溶液。

(4)将嵌有组织因子的磷脂囊泡溶液分别和不同浓度的胶原蛋白溶液混合，然后加入二氧化硅粉末，将三者直接混合通过pH调节使胶原蛋白混合溶液交联形成水凝胶。

2.根据权利要求1所述的由胶原蛋白和二氧化硅体系构建止血敷料的制备方法，其特征在于，质粒为pET-22b,pET-28a中的一种,细菌为大肠杆菌感受态细胞C41、BL21和DH5α中的一种，但不仅限于这几种。

3.根据权利要求2所述的由胶原蛋白和二氧化硅体系构建止血敷料的制备方法，其特征在于，磷脂为磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰乙醇胺(PE)和甘油磷脂酸(PA)中的一种或多种，但不仅限于这几种。

4.根据权利要求3所述的由胶原蛋白和二氧化硅体系构建止血敷料的制备方法，其特征在于，胶原蛋白为胶原蛋白家族中的间质胶原、基底膜胶原和细胞外周胶原中的一种或多种，但不仅限于这几种。

5.根据权利要求4所述的由胶原蛋白和二氧化硅体系构建止血敷料的制备方法，其特征在于，间质胶原为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型胶原蛋白中的一种或多种,但不仅限于这几种。

6.根据权利要求5所述的由胶原蛋白和二氧化硅体系构建止血敷料的制备方法，其特征在于，步骤(1)中将组织因子基因嵌入质粒pET-28a中，将载有组织因子基因的质粒转化到感受态细胞BL21中。

7.根据权利要求6所述的由胶原蛋白和二氧化硅体系构建止血敷料的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，超声温度在0～80℃，超声时间为20～60分钟，生物珠的加入量为0.35～0.5g。

8.根据权利要求7所述的由胶原蛋白和二氧化硅体系构建止血敷料的制备方法，其特征在于，超声温度60℃，超声时间为30min，生物珠的加入量为0.4g，所述的具体过程为：将步骤(2)中得到的囊泡与组织因子混合，加入0.05g生物珠，摇床振荡90min，再加入0.35g生物珠振荡90min后，将溶液吸出得到组织因子-磷脂囊泡结合体。

9.根据权利要求7或8所述的由胶原蛋白和二氧化硅体系构建止血敷料的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，胶原蛋白溶液的浓度为0.1％～2.5％。

10.根据权利要求9所述的由胶原蛋白和二氧化硅体系构建止血敷料的制备方法，其特征在于，胶原蛋白浓度为0.1％、0.3％、0.5％。

11.根据权利要求9或10所述的由胶原蛋白和二氧化硅体系构建止血敷料的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，二氧化硅质量在0.1～10mg。

12.根据权利要求11所述的由胶原蛋白和二氧化硅体系构建止血敷料的制备方法，其特征在于，二氧化硅质量在5mg。

13.根据权利要求1-12任意项所述的由胶原蛋白和二氧化硅体系构建止血敷料的制备方法，其特征在于，该止血敷料可用于需要止血的环境，伤口处生理环境。