[发明专利]NGF作为用于治疗食管癌的药物及诊断试剂盒的应用

说明书

NGF作为用于治疗食管癌的药物及诊断试剂盒的应用属于生物医药领域。本发明利用干扰NGF基因的表达载体，通过大量体外细胞实验证明干扰NGF基因的表达水平能够对食管癌细胞的增殖、迁移起到抑制作用。并通过荧光定量PCR和Western Blot实验表明，NGF基因表达受到干扰后，与细胞恶性增殖相关的蛋白激酶B(AKT)信号通路被抑制，且其下游Cyclin D1即G1/S‑特异性周期蛋白‑D1以及基质金属蛋白酶MMP2的基因表达水平受到抑制，进一步从基因和蛋白的分子水平证实了NGF通过激活AKT信号通路能够对食管癌的发生和发展起促进作用，提示NGF及其调控的下游产物可作为食管癌临床治疗的靶标。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及神经生长因子NGF作为治疗食管癌的药物或诊断试剂盒中的应用。

背景技术

食管癌在全球癌症死因中排名第六位，每年约有30万人死于食管癌，流行病学显示，食管癌的发病率在不同地区和人群间有着很大差异，亚洲地区发病率明显高于其他国家，并且男性发病率高于女性，且以40岁以上的中老年人为主。我国每年因食管癌病逝的约有15万人，占全球食管癌死亡率的二分之一，是食管癌的高发地区。食管癌的早期典型症状主要表现为吞咽困难，中后期会出现癌症转移至神经、肝脏等器官，引起胸骨疼痛等症状。目前认为食管的发生与长期嗜好吸烟饮酒、摄入过硬过热的食物、进食过快有关，但造成食管癌的具体机制还尚未研究清楚。

按照组织类型可将食管癌主要分为食管腺癌(EAC)和食管鳞癌(ESCC)两种类型。其中EAC在白色人种中发病率较高，而我国食管癌发生的主要组织类型为ESCC。ESCC通过多步过程发展，从正常的鳞状上皮开始，发展为低度上皮内瘤样变(LGIN)，高度上皮内瘤样变(HGIN)，最后发展为浸润性癌。研究表明，表皮生长因子(EGF)和表皮生长因子受体(EGFR)在ESCC中过表达，并且与不良的预后相关联。此外，诸如RAS和AKT途径信号通路都被认为与ESCC的发展有关。

神经生长因子(NGF，nerve growth factor)是神经营养素家族之一，在20世纪40年代由Rita Levi-Montalcini提出，自最初发现以来，就促进了神经生物学的巨大进步。在哺乳动物的胚胎发育过程中，未成熟的神经元竞争供应有限的靶标NGF，从而获得营养因子支持，以使其存活。此外，NGF起着生存信号的作用，目标衍生的NGF向细胞体发送逆行信号并支持神经元存活，使神经支配神经元的数量和特性与目标组织或器官的需求相匹配。NGF还在轴突末端发出局部信号，以促进突触发展和靶向神经支配，即使神经元的大小发生变化，也可以确保适当的神经支配。因此，NGF在神经元(包括NGF依赖性初级传入神经和交感神经节后神经元)的存活和维持中起着关键作用。除了促进神经元发育作用外，NGF与其受体酪氨酸激酶TrkA或其他低亲和力p75神经营养蛋白受体p75NTR结合调节周围神经元的表型，如细胞体和树突大小以及神经递质的释放。NGF在影响疼痛机制，神经系统疾病领域内已有了较为成熟的应用和发展。

近年来的一些研究发现，NGF除了在神经系统上的作用外，还与多种癌症的发生密切相关，如发现在胃癌、胰腺癌、卵巢癌中均发现NGF表达含量升高。在胃癌中，胆碱能刺激胃上皮细胞从而诱导NGF表达，进而促进神经浸润和癌变。通过抗NGF抗体或TrkA抑制剂阻断NGF/TrkA信号传导可降低毒蕈碱型乙酰胆碱诱导的细胞增殖和肿瘤发生，因此可将前馈ACh-NGF轴作为肿瘤治疗和预防的靶标。在胰腺癌中，通过金纳米簇辅助递送抗NGF的siRNA，从而抑制了小鼠胰腺肿瘤的进展，证明了靶向NGF能够作为一种潜在治疗胰腺癌的策略。并且目前的临床样本中已经发现NGF在食管鳞状细胞癌中也存在着过量表达，但其对于食管癌的作用机制还尚未研究清楚。