[发明专利]一种高产环孢菌素的植物内生镰刀菌及其应用

说明书

本发明涉及一种高产环孢菌素的植物内生镰刀菌及其运用，该高产环孢菌素的植物内生镰刀菌为镰刀菌(Fusariumsp.)HU0298，通过对镰刀菌(Fusariumsp.)HU0298菌株发酵培养、提取分离而获得发酵产物环孢菌素衍生物，采用液体发酵和固体发酵两种方式，对镰刀菌(Fusarium sp.)HU0298的发酵培养条件进行优化，具有生产工艺相对简单和易于规模发酵生产的优点，能够大幅度提高环孢菌素A的单位产量，减少废弃物产量和降低生产成本，在制备环孢菌素A中具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，涉及微生物及其应用，具体涉及一种高产环孢菌素的植物内生镰刀菌及其应用。

背景技术

环孢菌素(Cyclosporine)是一类由11个氨基酸残基组成的结构独特的亲脂性环状多肽，迄今通过天然产物分离和半合成获得的环孢菌素共30多个。其中环孢菌素A的免疫抑制活性强、选择性高，且对骨髓和巨噬细胞几乎没有抑制作用，自1983年获批用于临床肾移植的几十年来，环孢菌素A一直作为最主要的临床一线抗排斥药物之一，广泛用于肾脏、肝脏、心脏等器官及骨髓移植。随着器官移植技术不断发展，器官移植成功率越来越高，患者也越来越普遍，而且这些移植患者往往需要多年乃至终身用药。

环孢菌素A除免疫抑制活性外，还具有抗真菌、抗虫、抗炎和抗病毒等多种生物活性，还常用于多种难治性皮肤病和自身免疫性血液病等疾病的治疗，环孢菌素A是重要的药物分子，在农用和养殖等领域也表现出明显的应用潜力，现有原料需求和潜在需求量大，环孢菌素A的高产菌株的发现和制备工艺研究一直备受关注。

然而环孢菌素A是分子量较大的环十一肽化合物，其中多个氨基酸残基为非常见氨基酸，且具有12个手性中心，人工合成较为困难。迄今为止，环孢菌素A的来源仍依靠微生物发酵和分离纯化获得，现有的野生真菌菌株的环孢菌素产率都在1.0g/L以下，且其生产培养基组分复杂、部分原料价格较高，发酵培养工艺繁琐，需要大规模的设备投入，生产成本高，寻找环孢菌素A高产菌株和简单高效、低成本的发酵培养及制备方法，一直是相关制药企业的重要关注点。

发明内容

基于此，有必要提供一种高产环孢菌素的植物内生镰刀菌和利用该菌简单高效、低成本地制备环孢菌素A上的应用。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

一种高产环孢菌素的植物内生镰刀菌，所述高产环孢菌素的植物内生镰刀菌为镰刀菌(Fusarium sp.)HU0298，分离于广东省汕头市南澳岛海滩植物酸模(Rumex acetosa)植株中。

该菌株(生物材料)的保藏信息为：

名称：镰刀菌(Fusarium sp.)HU0298；

保藏编号：GDMCC No.61466；

保藏单位：广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)；

保藏地址：广州市越秀区先烈中路100号，广东省微生物研究所，邮编：510075；

保藏时间：2021年1月26日。

镰刀菌(Fusarium sp.)HU0298的保存方法：采用PDA培养基保存。PDA培养基：土豆200g，葡萄糖20g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH调至7.0。