[发明专利]具有启动子活性的多核苷酸及其用途和生产目标化合物的方法

权利要求书

1.一种具有启动子活性的多核苷酸，其中，所述多核苷酸选自如下(i)-(vi)组成的组中的任一项：

(i)包含如SEQ ID NO：2所示序列的多核苷酸的突变体，所述突变体在SEQ ID NO：2所示序列的第170-179位中的一个或多个位置处具有突变的核苷酸；所述突变体的活性高于包含如SEQ ID NO：2所示序列的多核苷酸的启动子活性，且所述突变体在SEQ ID NO：2所示序列的第170-179位中的核苷酸序列不为ACACCGAGTG；

(ii)包含如SEQ ID NO：3所示序列的多核苷酸的突变体，所述突变体在SEQ ID NO：3所示序列的第130-139位中的一个或多个位置处具有突变的核苷酸；所述突变体的活性高于包含如SEQ ID NO：3所示序列的多核苷酸的启动子活性，且所述突变体在SEQ ID NO：3所示序列的第130-139位中的核苷酸序列不为ACACCGAGTG；

(iii)包含如SEQ ID NO：4所示序列的多核苷酸的突变体，所述突变体在SEQ ID NO：4所示序列的第72-81位中的一个或多个位置处具有突变的核苷酸；所述突变体的活性高于包含如SEQ ID NO：4所示序列的多核苷酸的启动子活性，且所述突变体在SEQ ID NO：4所示序列的第72-81位中的核苷酸序列不为ACACCGAGTG；

(iv)包含与(i)至(iii)中任一项所示的核苷酸序列的反向互补序列的多核苷酸；

(v)包含在高严格性杂交条件或非常高严格性杂交条件下，能够与(i)至(iii)中任一项所示的核苷酸序列杂交的序列的反向互补序列的多核苷酸；

(vi)包含与(i)至(iii)中任一项所示的核苷酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％序列同一性的序列的多核苷酸。

2.根据权利要求1所述的具有启动子活性的多核苷酸，其中，所述突变体在盐浓度或渗透压升高的环境中具有提高的启动子活性；

优选地，所述突变体与包含如SEQ ID NO：2所示序列的多核苷酸相比，在盐浓度或渗透压升高的环境中具有1-8倍以上提高的启动子活性。

3.根据权利要求1-2任一项所述具有启动子活性的多核苷酸，其中，所述突变体对应SEQ ID NO：2所示序列的第170-179位，或对应SEQ ID NO：3所示序列的第130-139位，或对应SEQ ID NO：4所示序列的第72-81位的核苷酸序列选自如下(p₁)-(p₁₂)组成的组中的任一项：

(p₁)TACTTGCAGA，

(p₂)AGTGCTGAAA，

(p₃)GCACGAAAGG，

(p₄)TATCTAGAGG，

(p₅)AGGCTTGTCG，

(p₆)CGCTTCTTTC，

(p₇)TAACTCTTGG，

(p₈)CCAAGTTCCA，

(p₉)CGGTGCCACA，

(p₁₀)AGCAGTTAGG，

(p₁₁)AGATAAATAA，

(p₁₂)ATCGATCTAG。

4.根据权利要求1-3任一项所述的具有启动子活性的多核苷酸，其中，所述突变体的核苷酸序列选自如SEQ ID NO：5-16任一项所示的序列。

5.一种转录表达盒，其中，所述转录表达盒包含根据权利要求1-4任一项所述的具有启动子活性的多核苷酸；可选地，所述转录表达盒还含有目标基因，所述目标基因与所述具有启动子活性的多核苷酸可操作地连接；优选地，所述目标基因为蛋白编码基因。

6.一种重组表达载体，其中，所述重组表达载体包含权利要求1-4任一项所述的具有启动子活性的多核苷酸，或权利要求5所述的转录表达盒。