[发明专利]CYP4F22基因突变体、多肽、试剂盒、构建体及重组细胞

说明书

本发明属于生物基因工程技术领域，公开了一种CYP4F22基因突变体、多肽、试剂盒、构建体及重组细胞，所述编码CYP4F22突变体的核酸是第8号外显子的844位核苷酸，存在C→T突变，或第11号外显子的1189位核苷酸，存在C→T突变；所述多肽具有p.R282W或p.R397C突变；所述试剂盒含有特异检测CYP4F22基因突变体p.R282W或p.R397C的试剂；所述核酸构建体含有CYP4F22基因p.R282W或p.R397C突变体；所述重组细胞由所述核酸构建体转染受体细胞获得。本发明可以用于先天性鱼鳞病的辅助诊断，用于发现先天性鱼鳞病潜在携带者，为该病的产前基因诊断提供依据。

技术领域

本发明属于生物基因工程技术领域，尤其涉及一种CYP4F22基因突变体、多肽、试剂盒、构建体及重组细胞。

背景技术

目前，先天性鱼鳞病是一组罕见的皮肤角化异常疾病，主要表现为全身表皮脱屑异常，并伴有一系列症状，如新生儿火棉胶膜、睑外翻、子痫、头皮和眉毛瘢痕性脱发、掌跖角化过度、多汗和可变红斑。先天性鱼鳞病包括临床表现和严重程度不同的几个主要亚型，包括丑角型鱼鳞病、板层型鱼鳞病和先天性鱼鳞病样红皮病。

CYP4F22作为导致先天性鱼鳞病的致病基因之一，其致病突变较为罕见，到目前为止，国内外共发现50个致病突变，其中超过70％的致病突变是点突变导致的错义突变和无义突变。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：CYP4F22基因新发变异缺乏蛋白水平的功能数据，影响新发变异的致病性评级，阻碍了该病临床诊断的确立和相关家庭的再生育产前基因诊断的进行。目前国际上还没有关于 CYP4F22基因相关突变位点导致先天性鱼鳞病的报道。

解决以上问题及缺陷的难度为：目前没有直接可利用的带有特定突变的 CYP4F22基因的构建体用于体外功能研究；缺乏带有特定突变的CYP4F22多肽；没有带有特定突变构建体的重组细胞，这几个问题均阻碍了CYP4F22基因新发变异的致病性评级。

解决以上问题及缺陷的意义为：以上问题的解决可以明确鱼鳞病表型相关的CYP4F22基因中新发变异的致病性，为明确患者的分子遗传学诊断、指导患者的精准治疗及其避免该家系的再生育风险有重要意义。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种CYP4F22基因突变体、多肽、试剂盒、构建体及重组细胞。

本发明是这样实现的，一种CYP4F22基因突变体，所述编码CYP4F22突变体的核酸是第8号外显子的844位核苷酸，存在C→T突变，序列为SEQ ID NO：3；或第11号外显子的1189位核苷酸，存在C→T突变；序列为SEQ ID NO：5。

本发明的另一目的在于提供一种应用所述的CYP4F22基因突变体的多肽，所述多肽具有p.R282W，氨基酸序列为SEQ ID NO：4；或p.R397C突变，氨基酸序列为SEQ ID NO：6。

本发明的另一目的在于提供一种应用所述的CYP4F22基因突变体的用于筛选易患先天性鱼鳞病的生物样品的试剂盒，所述用于筛选易患先天性鱼鳞病的生物样品的试剂盒含有特异检测CYP4F22基因突变体p.R282W或p.R397C的试剂。

进一步，所述试剂为核酸引物：

CYP4F22基因c.844C→T突变所在外显子8的扩增引物：正向 5'-ggctcagacctgtaacccag-3'(SEQ ID NO：7)，反向5'-gagccaccacgcctaatg-3'(SEQ ID NO：8)；

CYP4F22基因c.1189C→T突变所在外显子11的扩增引物：正向 5'-ggtggctcggcctctag-3'(SEQ ID NO：9)，反向5'-tctccctgcacacacaactg-3'(SEQ ID NO：10)。