[发明专利]一种用于真菌毒素生产的混合培养基的配制方法有效
申请号: | 202110488779.6 | 申请日: | 2021-04-30 |
公开(公告)号: | CN113234604B | 公开(公告)日: | 2023-06-27 |
发明(设计)人: | 徐永威;赵志辉;韩铮;郭文博;谭晓杰;郏征伟 | 申请(专利权)人: | 裕菁科技(上海)有限公司;上海市农业科学院 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P1/02;C12R1/645 |
代理公司: | 上海段和段律师事务所 31334 | 代理人: | 李佳俊;郭国中 |
地址: | 200131 上海市浦东新区(上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 真菌 毒素 生产 混合 培养基 配制 方法 | ||
1.一种用于脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒素生产的混合培养基的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
步骤一、分别将玉米和花生饼60℃烘干4h,然后粉碎,过50目标准筛,得50目玉米粉和花生饼粉,并将玉米粉和花生饼粉按照重量比10:1预混均匀,作为原料成分A;
步骤二、将玉米芯经干燥后进行粉碎、过5目筛处理,得到5目的干燥粉,作为原料B;
步骤三、取纯净水或蒸馏水作为原料C;
步骤四、将原料A、B、C按照0.1:0.3:1的比例混合均匀,该比例按照重量计算,成分A、B为干燥至含水率低于20%后重量,成分C为直接称取重量;然后称取10份混合物料,每份45克,分别放入250mL三角瓶,并用双层纱布封口,即可得到用于真菌培养的原料D;
步骤五、将步骤四得到的原料D经121℃水蒸气在0.2MPa压力下灭菌20min,冷却后,将灭菌后的原料D转移到生物安全柜,进行预先活化好的镰刀菌的接种,接种后充分混匀物料,尽量让镰刀菌菌种与培养物料分布均匀,然后放入培养箱中,在28℃、80%湿度条件下暗黑培养3天,3天后再次无菌操作混匀物料,混匀物料后温度不变、湿度调整为60%,继续暗黑培养10天,即可得到产生DON毒素的培养物料。
2.一种用于玉米赤霉烯酮毒素生产的混合培养基的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
步骤一、将重量比为10:1的大米、大豆进行干燥粉碎,过筛50目标准筛,获得50目粉状原料,作为原料成分A;
步骤二、将重量比为1:1的玉米杆、玉米芯经干燥后进行粉碎、过5目标准筛处理,得到5目的干燥粉,作为原料B;
步骤三、取纯净水或蒸馏水作为原料C;
步骤四、将上述步骤一至步骤三获得的原料A、B、C按照2:1:5的比例混合均匀,该比例按照重量计算,成分A、B为干燥至含水率低于20%后重量,成分C为直接称取重量,即可得到用于真菌培养的原料D;
步骤五、将步骤四得到的原料D经121℃水蒸气在0.2MPa压力下灭菌20min,冷却后,将灭菌后的原料D转移到生物安全柜,进行预先活化好的镰刀菌的接种,接种后充分混匀物料,尽量让镰刀菌菌种与培养物料分布均匀,然后放入培养箱中,在28℃、80%湿度条件下暗黑培养3天,3天后再次无菌操作混匀物料,混匀物料后温度不变、湿度调整为60%,继续暗黑培养10天,即可得到产生ZEN毒素的培养物料。
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