[发明专利]快速筛查中成药及保健食品中非法添加比沙可啶的方法

权利要求书

1.一种快速筛查中成药及保健食品中非法添加比沙可啶的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将比沙可啶对照品溶于丙酮中，得到第一对照品溶液，并将供试品和阴性样品溶于丙酮并稀释分别得到第一供试品溶液和第一阴性样品溶液，取第一供试品溶液和第一对照品溶液，分别点于同一硅胶薄层板，以二甲苯-丁酮为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯下检视，第一供试品溶液薄层色谱应不得检出与第一对照品溶液薄层色谱所显主斑点位置和颜色一致的主斑点，若检出相应主斑点，则进一步通过液相色谱仪进行筛查；

（2）将步骤（1）的比沙可啶对照品、供试品和阴性样品分别溶于甲醇中溶解并稀释，得到第二对照品溶液、第二供试品溶液和第二阴性样品溶液，将第二供试品溶液和第二对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图及DAD光谱图，若检出与对照品色谱保留时间及DAD光谱一致的色谱峰，则第二供试品溶液呈阳性，之后采用液相色谱-质谱联用仪确证；

（3）取步骤（2）中检出阳性的第二供试品溶液，并取第二对照品溶液和第二阴性样品溶液依次注入液相色谱-质谱联用仪，记录液相色谱图及一级质谱图和二级质谱图，第二供试品溶液的色谱图中，应不得检出与第二对照品溶液色谱保留时间、一级质谱图一致的色谱峰，若检出相应的色谱峰，则确定非法添加比沙可啶。

2.如权利要求1所述的快速筛查中成药及保健食品中非法添加比沙可啶的方法，其特征在于，所述液相色谱仪的检测条件如下：

液相色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；

检测器：二极管阵列检测器；

检测波长：265nm；

扫描波长：210-400nm；

柱温：35℃；

流速：1.0ml•min^-1；

流动相：乙腈-水，乙腈和水的体积比为45:55。

3.如权利要求1所述的快速筛查中成药及保健食品中非法添加比沙可啶的方法，其特征在于，所述液相色谱-质谱联用仪的色谱检测条件如下：

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；

检测波长：265nm；

流动相：乙腈-0.01mol•L^-1醋酸铵溶液（0.1%甲酸），乙腈和醋酸铵溶液的体积比为40：60；

流速：0.3ml•min^-1。

4.如权利要求3所述的快速筛查中成药及保健食品中非法添加比沙可啶的方法，其特征在于，所述液相色谱-质谱联用仪的质谱检测条件如下：

配有电喷雾离子化源，ESI+扫描；

干燥气温度：350℃；

毛细管电压：3.5KV；

锥孔电压：120V；

干燥气温度：350℃；

干燥气流量：10L·min^-1；

扫描方式：一级质谱全扫描、二级质谱扫描；

扫描范围：100-1000。

5.如权利要求1所述的快速筛查中成药及保健食品中非法添加比沙可啶的方法，其特征在于，所述第一对照品溶液的制备方法具体为：取比沙可啶对照品，用丙酮溶解并稀释，制成每1ml含1mg的第一对照品溶液。

6.如权利要求1所述的快速筛查中成药及保健食品中非法添加比沙可啶的方法，其特征在于，所述第二对照品溶液的制备方法具体为：取比沙可啶对照品，用甲醇溶解并稀释，制成每1ml含1mg的第二对照品溶液。

7.如权利要求1所述的快速筛查中成药及保健食品中非法添加比沙可啶的方法，其特征在于，所述第一供试品溶液的制备方法具体为：取第一若供试品为固体制剂，研细，精密称取一次取用量，用丙酮溶解并稀释；若供试品为液体制剂，摇匀，精密量取一次取用量用丙酮溶解并稀释；滤过，取滤液作为供试品溶液。

8.如权利要求1所述的快速筛查中成药及保健食品中非法添加比沙可啶的方法，其特征在于，所述第二供试品溶液的制备方法具体为：

若供试品为固体制剂，研细，精密称取一次取用量，置量瓶中，加甲醇，超声处理后，放至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过；若供试品为液体制剂，摇匀，精密量取一次取用量，置量瓶中，加甲醇，振摇，加甲醇稀释至刻度，摇匀，摇匀后用微孔滤膜滤过；滤液作为第二供试品溶液。