[发明专利]OsCDKB1；1蛋白及其编码基因在水稻耐盐中的功能与应用

说明书

本发明公开了一种提高植物耐盐性的方法，包括如下步骤：抑制受体植物中OsCDKB1；1基因的表达，得到耐盐性强于所述受体植物的目的植物。本发明还公开了一种培育盐敏感植物的方法，包括将OsCDKB1；1基因在目的植物中过表达，对盐的敏感性高于所述目的植物的盐敏感植物。实验证明，过表达OsCDKB1；1基因的转基因水稻与受体水稻相比，对盐的敏感性显著增加，而OsCDKB1；1基因沉默的转基因水稻与受体水稻相比，耐盐性显著增强，说明调控OsCDKB1；1基因可调控耐盐性是与耐盐相关的基因，且抑制OsCDKB1；1基因的表达可提高植物的耐盐性，提高植物的抗逆能力。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中一种OsCDKB1；1蛋白及其编码基因在水稻耐盐中的功能与应用。

背景技术

植物的生长过程会受到多种非生物胁迫的干扰，主要是指在特定环境下，任何非生物因素对植物所造成的不利影响，包括干旱、低温、盐碱等因素。其中盐是制约植物生长的一个很主要的胁迫因素。非生物胁迫严重制约植物尤其是作物的生长发育，使得人类在农业生产上面临许多难题。尤其是在全球土地盐渍化程度加深，可使用耕地面积越来越少的今天，对植物抗盐的研究需求越来越紧迫，研究植物响应非生物胁迫的应答响应基因及其作用机制研究已成为当今热点的研究话题，筛选与培育与植物耐盐性相关的基因品种也是分子育种的核心需求。

作为世界上最重要的粮食作物之一，水稻养活了世界上超过一半的人口。水稻比其他作物如玉米、小麦等的基因组小，基因组长度大约为420Mb，成为继拟南芥(Arabidopsis thaliana)之后的另外一类重要的模式植物。近些年来水稻已被广泛应用于植物遗传学、发育生物学和分子生物学的研究。面对农作物生产中日益严重的土壤盐渍化问题，克隆水稻耐盐基因并对其功能进行研究，对尽快培育作物耐盐品种有重要的实践意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何提高植物的耐盐性。

为了解决以上技术问题，本发明的第一个目的是提供了一种提高植物耐盐性的方法，包括如下步骤：抑制受体植物中OsCDKB1；1基因的表达，得到耐盐性强于所述受体植物的目的植物；所述OsCDKB1；1基因编码OsCDKB1；1蛋白；所述OsCDKB1；1 蛋白是如下A1)、A2)或A3)的蛋白质：

A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质；

A2)将A1)的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有90％以上的同一性且对高盐具有敏感性的蛋白质；

A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白质标签得到的融合蛋白质。

其中，序列表中的序列1由303个氨基酸残基组成。

上述方法中，所述蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。

上述方法中，所述蛋白质标签(protein-tag)是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白质一起融合表达的一种多肽或者蛋白质，以便于目的蛋白质的表达、检测、示踪和/或纯化。所述蛋白质标签可为Flag标签、His标签、MBP标签、HA标签、myc 标签、GST标签和/或SUMO标签等。

上述方法中，所述同一性是指氨基酸序列的同一性。可使用国际互联网上的同源性检索站点测定氨基酸序列的同一性，如NCBI主页网站的BLAST网页。例如，可在高级BLAST2.1中，通过使用blastp作为程序，将Expect值设置为10，将所有Filter 设置为OFF，使用BLOSUM62作为Matrix，将Gap existence cost，Perresidue gap cost 和Lambdaratio分别设置为11，1和0.85(缺省值)并进行检索一对氨基酸序列的同一性进行计算，然后即可获得同一性的值(％)。