[发明专利]一种载siRNA纳米脂质杂化胶束及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种载siRNA纳米脂质杂化胶束，其特征在于，所述纳米脂质杂化胶束包含siRNA、由内向外包覆siRNA的阳离子脂质、脂质外层；

所述脂质外层由DSPE-PEG2000-FA、磷脂和胆固醇组成；

所述siRNA的sense和antisense的核苷酸序列为分别为：5’-CAUCAUAGCUACCAUUUAUU -3’，5’-AAUAAAUGGUAGCUAUGAUG-3’；

所述阳离子脂质为DLin-MC3-DMA；

所述脂质外层中DSPE-PEG2000-FA与磷脂的质量比为1:(5~10)，胆固醇与磷脂的质量比为1:(4~6)；

所述载siRNA纳米脂质杂化胶束，采用包括以下步骤的方法制备得到：

1）将阳离子脂质DLin-MC3-DMA配制得到胶束溶液，滴加至siRNA溶液中反应得到siRNA@DLin-MC3-DMA复合物；

2）将步骤1）得到的siRNA@DLin-MC3-DMA复合物与DSPE-PEG2000-FA、磷脂和胆固醇溶解于氯仿中，旋干溶剂，形成薄膜；再将薄膜重新分散到PBS溶液中，超声后进行高压均质循环，分离纯化得到载siRNA纳米脂质杂化胶束。

2.如权利要求1所述的载siRNA纳米脂质杂化胶束的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）将阳离子脂质DLin-MC3-DMA配制得到胶束溶液，滴加至siRNA溶液中反应得到siRNA@DLin-MC3-DMA复合物；

2）将步骤1）得到的siRNA@DLin-MC3-DMA复合物与DSPE-PEG2000-FA、磷脂和胆固醇溶解于氯仿中，旋干溶剂，形成薄膜；再将薄膜重新分散到PBS溶液中，超声后进行高压均质循环，分离纯化得到载siRNA纳米脂质杂化胶束。

3.如权利要求2所述的载siRNA纳米脂质杂化胶束的制备方法，其特征在于，所述步骤1）中，DLin-MC3-DMA胶束溶液浓度为0.1mg/mL，siRNA溶液浓度为20μM，DLin-MC3-DMA胶束溶液与siRNA溶液的体积比为(20~30):1。

4.如权利要求2所述的载siRNA纳米脂质杂化胶束的制备方法，其特征在于，所述步骤2）中，siRNA@DLin-MC3-DMA复合物中DLin-MC3-DMA与DSPE-PEG2000-FA的质量比为(0.08~0.33):1。

5.如权利要求1所述的载siRNA纳米脂质杂化胶束在制备治疗子痫前期药物中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述载siRNA纳米脂质杂化胶束在制备治疗子痫前期的可靶向胎盘的药物中的应用。