[发明专利]一种用于重组表达棘白菌素B脱酰基酶的表达盒及应用

权利要求书

1.一种用于重组表达棘白菌素B脱酰基酶的表达盒，其特征在于，包括依次连接的启动子核酸序列、RBS核酸序列、编码OmpA信号肽的核酸序列、编码第一促溶肽的核酸序列、编码棘白菌素B脱酰基酶α亚基的核酸序列、第一终止密码子、RBS核酸序列、编码OmpA信号肽的核酸序列、编码棘白菌素B脱酰基酶β亚基的核酸序列、编码第二促溶肽的核酸序列、第二终止密码子，

其中，第一促溶肽的氨基酸序列为：GEGEG；第二促溶肽的氨基酸序列为：KKKKKK。

2.如权利要求1所述的表达盒，其特征在于，RBS核酸序列：TTTGTTTAACTTTAAGAAGGAGA；编码OmpA信号肽的核酸序列：ATGAAAAAGACAGCTATCGCGATTGCAGTGGCACTGGCTGGTTTCGCTACCGTAGCGCAGGCC；编码棘白菌素B脱酰基酶α亚基的核酸序列与第一终止密码子的核酸序列：如SEQ ID No.6所示；编码棘白菌素B脱酰基酶β亚基的核酸序列：如SEQ ID No.7所示。

3.如权利要求2所述的表达盒，其特征在于，不包括启动子的核酸序列如SEQ ID No.24所示。

4.如权利要求1～3任一所述表达盒在重组表达棘白菌素B脱酰基酶中的应用。

5.包含如权利要求1～3任一所述表达盒的重组表达载体。

6.包含如权利要求5所述重组表达载体的基因工程菌，其特征在于，由宿主菌中转入所述重组表达载体得到。

7.如权利要求6所述基因工程菌，其特征在于，宿主菌为大肠杆菌。

8.一种用于重组表达棘白菌素B脱酰基酶的方法，其特征在于，将权利要求7所述基因工程菌在培养基中发酵表达棘白菌素B脱酰基酶。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述基因工程菌用浓度为0.2～0.6mM的IPTG诱导；IPTG诱导时间5～20h；发酵温度16℃～24℃。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述基因工程菌用浓度为0.4mM的IPTG诱导；IPTG诱导时间15h；发酵温度20℃。