[发明专利]一种基于1083骨架的疫苗制备方法有效
申请号: | 202110434216.9 | 申请日: | 2021-04-22 |
公开(公告)号: | CN114940999B | 公开(公告)日: | 2023-09-26 |
发明(设计)人: | 杨静;王升启;李蕾;王鑫;龙晋蓉;桑野;曹艺明;任晋;雷恩 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 |
主分类号: | C12N15/50 | 分类号: | C12N15/50;C12N15/47;C12N15/70;A61K39/215;A61K39/205;A61P31/14 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 王灏增 |
地址: | 100085*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 1083 骨架 疫苗 制备 方法 | ||
1.一种mRNA疫苗制备方法,其特征在于,包括将目的基因的mRNA插入在1083骨架上得到疫苗活性物质序列的步骤,所述1083骨架上骨架包括连接在目的mRNA的基因编码区5’端的5’-UTR7和连接在目的mRNA的基因编码区3’端的3’-UTR7和Poly A,所述5’-UTR7的序列如序列表中序列7的第1至46中的T替换为U所得到的序列;所述3’-UTR7的序列如序列表中序列7的第818至943中的T替换为U所得到的序列;所述Poly A的序列如序列表中序列7的第944至1063中的T替换为U所得到的序列。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述目的基因的mRNA为如下(1)-(6)中的任一所示:
(1)序列表中序列7的第47至817位中的T替换为U所得到的序列;
(2)序列表中序列9的第47至1444位中的T替换为U所得到的序列;
(3)序列表中序列10的第47至1675位中的T替换为U所得到的序列;
(4)序列表中序列11的第47至1807位中的T替换为U所得到的序列;
(5)序列表中序列12的第47至2320位中的T替换为U所得到的序列;
(6)序列表中序列13的第56至3913位中的T替换为U所得到的序列;
(7)序列表中序列14的第47到1636位中的T替换为U所得到的序列。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,将用于编码所述疫苗的基因导入载体得到重组载体,将所述重组载体转化重组菌后进行体外转录,得到疫苗。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述重组载体为如下(1)-(6)中的任一所示:
(1)将序列表中序列7的所示序列插入到载体pcDNA3.1(+)的NheI--XhoI位点之间,并保持载体其他位点不变的序列;
(2)将序列表中序列9的所示序列插入到载体pcDNA3.1(+)的NheI--XhoI位点之间,并保持载体其他位点不变的序列;
(3)将序列表中序列10的所示序列插入到载体pcDNA3.1(+)的NheI--XhoI位点之间,并保持载体其他位点不变的序列;
(4)将序列表中序列11的所示序列插入到载体pcDNA3.1(+)的NheI--XhoI位点之间,并保持载体其他位点不变的序列;
(5)将序列表中序列12的所示序列插入到载体pcDNA3.1(+)的NheI--XhoI位点之间,并保持载体其他位点不变的序列;
(6)将序列表中序列13的所示序列插入到载体pcDNA3.1(+)的NheI--XhoI位点之间,并保持载体其他位点不变的序列;
(7)将序列表中序列14的所示序列插入到载体pcDNA3.1(+)的NheI--XhoI位点之间,并保持载体其他位点不变的序列。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述重组菌为转化了权利要求4中所述的重组质粒的大肠杆菌感受态细胞。
6.权利要求1-5任一所述方法在制备疫苗中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,所述疫苗为新型冠状病毒疫苗或者狂犬病毒疫苗。
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