[发明专利]一种高效液相色谱检测三丁酸甘油酯的方法

说明书

本发明公开了一种高效液相色谱检测三丁酸甘油酯的方法，包括如下步骤：1、配制流动相；2、配制三丁酸甘油酯标准储备溶液；3、配制三丁酸甘油酯标准工作溶液；4、高效液相色谱检测；5、绘制标准曲线；6、配制三丁酸甘油酯样品溶液；7、三丁酸甘油酯样品的检测。该方法操作简单方便，检测时间短，精密度和准确度高，稳定性好。

技术领域

本发明涉及饲料检测技术领域，具体涉及一种高效液相色谱检测三丁酸甘油酯的方法。

背景技术

三丁酸甘油酯是一种丁酸的前体物质，可以天然过胃，为肠道提供快速高效的丁酸，可促进养殖动物肠道粘膜细胞的生长与修复，缓解肠道炎症，加强肠道屏障功能，提高养殖动物的生产性能。随着抗生素在饲料中的禁用，三丁酸甘油酯作为一种绿色、安全、有效的饲料添加剂现已广泛的应用于饲料与养殖行业。但是三丁酸甘油酯的检测没有对应的国标、行标与地标，也几乎找不到相关的文献报道，开发三丁酸甘油酯的高效液相色谱检测方法对于三丁酸甘油酯在市场上的规范应用具有重要的价值。

目前，生产三丁酸甘油酯的饲料企业大多采用皂化滴定的方法来检测三丁酸甘油酯产品的含量。此方法前处理操作复杂，检测一个样品需要耗费比较长的时间，而且检测的精密度和准确度不高，并且容易造假，易将其他的甘油脂肪酸酯误认为是三丁酸甘油酯，存在诸多缺陷。

发明内容

为了解决上述现有技术存在的问题，本发明提供了一种高效液相色谱检测三丁酸甘油酯的方法，该方法操作简单方便，检测时间短，精密度和准确度高，稳定性好。

实现本发明上述目的所采用的技术方案为：

一种高效液相色谱检测三丁酸甘油酯的方法，包括如下步骤：

1、配制流动相；

2、配制三丁酸甘油酯标准储备溶液：

准确称取三丁酸甘油酯标准品，用乙腈溶解，配制成三丁酸甘油酯标准储备溶液；

3、配制三丁酸甘油酯标准工作溶液：

取三丁酸甘油酯标准储备溶液，用乙腈稀释成一系列梯度浓度的三丁酸甘油酯标准工作溶液；

4、高效液相色谱检测：

色谱条件：

色谱柱采用wondasil C18-WR色谱柱或者性能相当者，流动相为有机相和水相的混合液，有机相为乙腈或甲醇，水相为水，有机相的体积百分含量为70-90％，水相的体积百分含量为10-30％，紫外检测器的检测波长为210-240nm，流速为0.8-1.2ml/min；

将一系列梯度浓度的三丁酸甘油酯标准工作溶液进行检测，得到各标准工作液中三丁酸甘油酯的峰面积；

5、绘制标准曲线：

以三丁酸甘油酯浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，根据检测的数据进行绘图，拟合后得到标准曲线，根据标准曲线得到标准曲线的函数关系式y＝k₁x+b₁；

6、配制三丁酸甘油酯样品溶液：

将三丁酸甘油酯标样品用乙腈溶解，配制成三丁酸甘油酯样品溶液；

7、三丁酸甘油酯样品的检测：

将三丁酸甘油酯样品溶液采用步骤4的条件进行检测，得到三丁酸甘油酯的峰面积，将三丁酸甘油酯的峰面积代入标准曲线的函数关系式中，得到三丁酸甘油酯样品溶液的浓度，将三丁酸甘油酯样品溶液的浓度乘以三丁酸甘油酯样品溶液的体积，得到三丁酸甘油酯样品的质量。

进一步，所述的色谱柱的柱长150-250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm。

进一步，所述的色谱柱的柱温为25-40℃。