[发明专利]一种用于提取核酸和PCR检测的微流控芯片及其应用有效
申请号: | 202110408434.5 | 申请日: | 2021-04-16 |
公开(公告)号: | CN113244970B | 公开(公告)日: | 2022-07-19 |
发明(设计)人: | 杨宇;赖天然;齐润姿;周永运;聂聪 | 申请(专利权)人: | 中国检验检疫科学研究院 |
主分类号: | B01L3/00 | 分类号: | B01L3/00;C12M1/40;C12M1/38;C12M1/00;C12Q1/6806;C12Q1/686 |
代理公司: | 北京中济纬天专利代理有限公司 11429 | 代理人: | 杨永莉 |
地址: | 100176 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 提取 核酸 pcr 检测 微流控 芯片 及其 应用 | ||
1.一种用于提取核酸和PCR检测的微流控芯片,其特征在于,其包括核酸提取反应仓、纯化反应仓和PCR反应仓,核酸提取反应仓和纯化反应仓的前端均连接有带有两分支进液仓,后端连通一个取液仓,PCR反应仓前端连通一个三分支进液仓,后端连通一个取液仓;
所述核酸提取反应仓、纯化反应仓制成一个芯片,PCR反应仓在另一芯片上,PCR反应仓设有一个或多个。
2.如权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述核酸提取反应仓、纯化反应仓、PCR反应仓的仓室体积大小为5~10μL。
3.如权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述核酸提取反应仓、纯化反应仓、PCR反应仓的形状为圆柱形仓室或方形仓室。
4.如权利要求1-3中任一项所述微流控芯片的使用方法,其特征在于,其包括细胞在芯片外裂解获得裂解后的样本液体,通过毛细管进入进液仓中,进液仓中裂解后的样本液体加入已经预埋好磁珠的核酸提取反应仓内,进行磁珠吸附,吸附后用buffer或者纯水在外加磁场固定磁珠情况下冲洗;如需要洗脱核酸加洗脱液,将含磁珠-核酸的冲洗液通过毛细管移入连通纯化反应仓的进液仓中,纯化反应仓通过另一分支的进液仓加入洗脱液进行洗脱;如果不需洗脱就直接将吸附核酸的磁珠运送到PCR反应仓,洗脱核酸后将核酸通过取液仓运送到PCR反应仓的进液仓,进入PCR反应仓,在连通PCR反应仓的另两个分支的进液仓中加入PCR反应液及酶,在PCR反应仓进行PCR反应,反应后通过PCR反应仓的取液仓移出PCR扩增产物;
所述核酸提取反应仓内还含有高盐低pH溶液下核酸吸附液,纯化反应仓内含有的洗脱液为低盐高pH溶液,将核酸洗脱下来,进入溶液中。
5.如权利要求4所述的使用方法,其特征在于,所有溶液的吸入与吸出由MFCS型压力驱动型微流体控制系统控制。
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