[发明专利]外泌体用于防止脑型疟疾发生的实验方法

权利要求书

1.一种外泌体用于防止脑型疟疾发生的实验方法，其特征在于：

S1、利用P.y17XNL鼠疟模型，提取外周血后超速离心法或磁珠免疫捕获法分离纯化外泌体；

S2、利用外泌体或外泌体联合CpGODN不同途径免疫正常C57BL/6J小鼠，固定时间点P.bANKA攻击，动态观察感染过程、神经系统症状和血脑屏障BBB完整性，确定外泌体的免疫效应；

所述S1具体包括外泌体提取和外泌体鉴定；

其中，外泌体提取包括BALB/c小鼠经腹腔注射1×10⁶P.y17XNL寄生的红细胞pRBC，确定虫血症20％-30％后提取外泌体；

采用超速离心法或磁珠免疫捕获法提取P.y17XNL感染的BALB/c小鼠外周血中的外泌体，测蛋白浓度后置于-80℃冰箱中备用；

所述外泌体鉴定包括采用透射电镜和WB方法对上述提取的外泌体形态结构、粒径大小和表面特异性分子的表达进行分析；

所述S2具体包括即外泌体免疫步骤如下：

C57BL/6J小鼠尾静脉注射外泌体5μg/只，于0天和20天各免疫一次；第二次免疫后20天C57BL/6J小鼠经腹腔注射1×10⁶P.bANKA寄生的红细胞pRBC；

外泌体联合CpGODN免疫：C57BL/6J小鼠皮下注射外泌体10μg/只联合CpG ODN10μg/只，20天后再次外泌体单独皮下注射5μg/只；第二次免疫后20天C57BL/6J小鼠经腹腔注射1×10⁶P.bANKA寄生的红细胞pRBC。