[发明专利]靶向Claudin18.2的人源化单克隆抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及靶向Claudin18.2的人源化单克隆抗体，及其制备方法和应用；本发明通过细胞融合和杂交瘤技术，获得的Claudin18.2人源化单克隆抗体能高特异性结合CHO‑Claudin18.2细胞，而几乎不结合CHO‑Claudin18.1细胞，本发明的Claudin18.2的人源化单克隆抗体制备方法步骤简单，获得的Claudin18.2人源化单克隆抗体对表达Claudin18.2阳性肿瘤细胞有良好的ADCC和CDC活性。本发明的Claudin18.2的人源化单克隆抗体特异性高且副作用小，在治疗和/或预防或诊断与Claudin18.2有关的疾病例如肿瘤的应用具有很好前景。

技术领域

本发明属于免疫治疗生物医药技术领域，涉及一种靶向Claudin18.2的人源化单克隆抗体，及其制备方法和应用，特别是在治疗和/或预防或诊断与Claudin18.2有关的疾病例如肿瘤的应用。

背景技术

胃癌是一种在世界范围内常见的癌症之一，在发达国家癌症相关的死亡因素中胃癌占第四(男性)和第五(女性)。大多数的胃癌患者在确诊后已经处于晚期阶段。早期胃癌通过胃部切除手术可能被治愈，复发率仍然达到50％。目前为止，晚期胃癌是不可治愈的，经过化疗中位生存期为8-10个月。研究多重化疗方案用于提高响应率和耐受性，然而5年生存率仍然是渺茫的。

Claudin-18(CLDN18)是在人类中由CLDN18基因编码的蛋白质。它属于claudins类别。Claudin-18属于大的claudin蛋白家族，可在上皮细胞中形成紧密的连接链。Claudin-18通过钙独立的细胞粘附活性，在紧密连接特异性清除细胞间隙中起主要作用。

现有数据表明，Claudin18.2作为一个高度特异性的细胞表面分子，在正常的组织中几乎不表达，仅表达在分化的胃粘膜上皮细胞上。在原发性胃癌及其转移后癌症类型中大部分都表达Claudin18.2分子，另外在胰腺癌，食管癌，卵巢癌，肺癌中也常常观察到Claudin18.2被激活表达。Claudin18.2的异常表达改变了紧密连接蛋白的正常结构及功能，从而使细胞极性丢失，并允许营养物质及其他对肿瘤细胞存活和生长的必需因子扩散，在肿瘤细胞的转移和肿瘤细胞的营养供给中起到重要作用。同时，Claudin18.2作为细胞膜表面蛋白，暴露的胞外结构允许抗体的结合，这些特点表明Claudin18.2是一个理想的治疗性单克隆抗体开发的靶点(参见Thorsten Klamp等人，Cancer Research(2011))。

此外，对于Claudin-18而言，具有Claudin18.1和Claudin18.2两个剪接变体，它们的第一胞外结构域之间仅具有八个氨基酸的差异，表达的组织部位也不同。因此在Claudin18.2药物的开发过程中，应注意与Claudin18.1容易引起交叉反应产生副作用这个问题。Claudin18.2在正常组织中的独特表达谱，以及在多种肿瘤中的异常表达情况使其成为了非常有吸引力的抗癌治疗靶标。因此，开发针对Claudin18.2的治疗性抗体具有更大的抗癌潜力、更低的毒性，有更大的最佳用药剂量空间。

发明内容

鉴于相关技术的上述问题和/或其他问题，本发明的目的是提供一种具有良好特异性、较高的亲和性和稳定性的靶向Claudin18.2的人源化单克隆抗体。

本发明的另一目的在于提供上述靶向Claudin18.2的人源化单克隆抗体的编码基因。

本发明的又一目的在于提供上述靶向Claudin18.2的人源化单克隆抗体的制备方法。

本发明的又一目的在于提供一种抗肿瘤制剂。

本发明的又一目的在于提供一种诊断检测制剂。

具体来说