[发明专利]一种用液相色谱分离测定普瑞巴林原料及液体制剂的方法

说明书

本发明属分析化学领域，本发明公开了一种用液相色谱分离测定普瑞巴林原料及液体制剂有关物质的方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱为固定相，以一定比例的磷酸缓冲盐溶液‑有机相为流动相，可以定量测定普瑞巴林及其关物质的含量，从而有效控制普瑞巴林及含普瑞巴林制剂产品的质量。本发明方法专属性强，准确度高，操作简便。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种用液相色谱分离测定普瑞巴林原料及液体制剂有关物质的方法。

背景技术

普瑞巴林为ɣ-氨基丁酸类似物，具有抗癫痫、镇痛和抗焦虑活性。临床上主要用于治疗外周神经痛，或辅助治疗部分性癫痫发作，普瑞巴林化学名为 (S)-3-(aminomethyl)-5-methylhexanoic acid，分子式为C₈H₁₇NO₂。普瑞巴林结构式为：

在普瑞巴林的工艺生产过程中，有几步重要的中间体可能会由于去除不完全而影响药物的纯度和质量，药物的杂质是指药物中存在的无治疗作用或者影响药物的稳定性、疗效,甚至对人体的健康有害的物质。对于普瑞巴林药物质量控制中的有关物质主要有4个，分别是有关物质1 (R)-3-(2-amino-2-oxoethyl)-5-methylhexanoic acid，有关物质2(S)-4-isobutylpyrrolidin-2-one，有关物质3 Isopropyl 3-(aminomethyl)-5-methylhexanoate，有关物质4 3-isobutylpentanedioic acid，结构式分别为：

对于普瑞巴林生产过程中引入的有关物质，不论是在原料药还是在制剂中都是需要进行质量控制的，因此，实现普瑞巴林及其有关物质的分离，在普瑞巴林的合成和制剂过程的质量控制方面具有重要的现实意义。方法建立之初发现，辅料峰干扰有关物质，通过多次相关技术讨论验证使其达到质控目的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分析普瑞巴林的纯度以及分离其有关物质的方法，从而实现普瑞巴林与其有关物质的分离和测定，保证普瑞巴林及含普瑞巴林制剂的质量控制。

本发明所述的用液相色谱分析普瑞巴林的纯度以及分离其有关物质的方法，是采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的磷酸缓冲盐溶液-有机相为流动相。

上述所说的有机相选自以下试剂中的一种或两种：甲醇、乙腈、丙醇、异丙醇、四氢呋喃等，优选甲醇和乙腈。

上述所说的方法，其流动相磷酸缓冲盐溶液-有机相采用浓度梯度洗脱。

上述所说的方法中，所说的磷酸缓冲盐选自以下盐中的一种：磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠等。

上述所说的方法中，所说的缓冲盐的用量为5～50mmol/L。其中缓冲盐溶液的pH为5~8。

本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现：

1) 取普瑞巴林或含普瑞巴林的制剂样品适量，分别用水溶解样品，配制成每1mL含普瑞巴林及其有关物质0.1～10.0mg的样品溶液；

2) 设置流动相流速为0.5～1.5mL/min，流动相流速优选1.0mL/min，检测波长为200～280nm，检测波长优选210nm，柱温箱温度为10～40℃，柱温箱温度优选25℃；

3) 取1)的样品溶液10～50μL，注入液相色谱仪，在上述所说的方法下，完成普瑞巴林与其有关物质的分离测定。其中：

高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为岛津：LC-20AT泵，SPD-M20A检测器，SIL-20AC自动进样器，CBM-20A控制器，CTO-10AS柱温箱，LC solution工作站

色谱柱：C₁₈（250×4.6mm，5μm）