[发明专利]一种基因工程菌株生物催化生产L-苯甘氨酸的方法

权利要求书

1.一种构建生产L-苯甘氨酸的基因工程菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将编码L-α-氨基酸脱氨酶的基因、编码羟基扁桃酸合成酶的基因和载体通过酶切连接，得到第一重组质粒；

将编码扁桃酸脱氢酶的基因、编码亮氨酸脱氢酶的基因和载体通过酶切连接，得到第二重组质粒；

将所述第一重组质粒和所述第二重组质粒共同转入宿主细胞中。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一重组质粒是以pET系列载体为表达载体；所述第二重组质粒是以pRSF系列载体为表达载体。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述宿主细胞为大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞。

4.权利要求1-3中任一项所述的方法构建的生产L-苯甘氨酸的基因工程菌。

5.一种表达权利要求4所述基因工程菌的方法，其特征在于，

将基因工程菌先接种于LB培养基中，过夜培养，之后按1:100比例将过夜培养物转接入TB培养液中培养2～3h，再加入诱导剂进行诱导培养16～24h。

6.一种生产L-苯甘氨酸的方法，其特征在于，以L-苯丙氨酸为底物，以权利要求4所述的基因工程菌为生物催化剂。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，反应条件为30℃，250rpm反应1～12h。

8.如权利要求6-7所述的方法在制备L-苯甘氨酸中的应用。