[发明专利]叶酸受体介导紫杉醇和羟基喜树碱超顺磁氧化铁纳米粒及其制备方法及用途

权利要求书

1.一种叶酸受体介导紫杉醇和羟基喜树碱超顺磁氧化铁纳米粒，其特征在于，所述的纳米粒为：p-PS/ FA@ PEG/PEI-SPIONs @PTX +HCPT；p-PS为磷酸根聚苯乙烯；

其制备方法包括以下步骤：

A、将FA接枝在PEG/PEI-SPIONs纳米粒的表面上，获得FA@PEG/PEI-SPIONs；

B、将p-PS接枝到FA@PEG/PEI-SPIONs上，获得p-PS/ FA@ PEG/PEI-SPIONs；

C、将PTX和HCPT接枝到p-PS/ FA@ PEG/PEI-SPIONs上，获得p-PS/ FA@ PEG/PEI-SPIONs @PTX +HCPT；

所述的步骤B中，将p-PS接枝到FA@PEG/PEI-SPIONs上的方法包括以下步骤：

取p-PS溶解于DMF中，在搅拌状态下逐滴滴加FA@PEG/PEI-SPIONs，在800-1500 rpm转速下磁力搅拌12-36h，然后离心取沉淀；其中，p-PS、DMF、FA@PEG/PEI-SPIONs的重量比为：5-15:3000-7000:1-5；然后用CHCl₃洗涤多次除去游离聚合物p-PS，得到p-PS/ FA@ PEG/PEI-SPIONs；

所述的步骤C中将PTX和HCPT接枝到p-PS/ FA@ PEG/PEI-SPIONs上的方法包括以下步骤：

a、将制得的p-PS/ FA@ PEG/PEI-SPIONs溶解在CHCl₃中，然后向该溶液中加入PTX和HCPT，获得混合液a；

b、将混合液a加入相当于DMF重量一半的浓度为2-8mg/ml的SDS溶液中，在120-200w功率下超声下乳化1-10分钟时间，获得乳化液；

c、将乳化液在室温下缓慢搅拌直至将CHCl₃至完全挥干，在1500-3000 rpm/min转速下离心3-10 min，收集沉淀和，用CHCl₃和蒸馏水交替清洗2-5次，最终获得p-PS/ FA@ PEG/PEI-SPIONs @PTX +HCPT纳米粒。

2.如权利要求1所述的叶酸受体介导紫杉醇和羟基喜树碱超顺磁氧化铁纳米粒，其特征在于，所述的步骤A中，PEG/PEI-SPIONs纳米粒的制备方法包括以下步骤：

将PEG-1000和PEI-1800混合均匀，在8-12min内升温至78-82℃，得混合液；将Fe(acac)₃添加到混合液中，在78-82℃下继续搅拌8-12min后，加热至250-270℃，保温0.5-1.5h后停止加热，冷却至50-70℃，得到含有PEG/PEI-SPIONs的混合液，分离得到PEG/PEI-SPIONs纳米粒；所述的PEG-1000、PEI-1800、Fe(acac)₃的质量比为12-17:0.1-0.5:0.5-1；

上述整个过程在磁力搅拌下进行，并通入氩气除氧。

3.如权利要求2所述的叶酸受体介导紫杉醇和羟基喜树碱超顺磁氧化铁纳米粒，其特征在于，所述的分离PEG/PEI-SPIONs纳米粒的方法包括以下步骤：

向冷却后的含有PEG/PEI-SPIONs纳米粒的混合液中加入甲苯进行超声分散，用磁铁在烧杯底部进行吸附，当黑色磁性物质基本被吸附至烧杯底部后，弃去上清夜，重复该清洗过程1-3次后，黑色沉淀物再用丙酮清洗1-3次，即得。

4.如权利要求1所述的叶酸受体介导紫杉醇和羟基喜树碱超顺磁氧化铁纳米粒，其特征在于，所述的步骤A中将FA接枝在PEG/PEI-SPIONs纳米粒的表面的方法包括以下步骤：

将PEG/PEI-SPIONs分散于去离子水中，获得PEG/PEI-SPIONs分散液，然后在快速搅拌的条件下，将PEG/PEI-SPIONs分散液缓慢滴加到FA活性酯中，在磁力搅拌下反应8-36 h后，然后用LS磁选柱对样品进行分离，最后用透析袋MWCO 8000-14000 Da透析，去除游离叶酸，直到透析液没有紫外吸收，得到FA@PEG/PEI-SPIONs分散液。