[发明专利]一种促进木材形成的基因OreFLA11及其应用有效

专利信息
申请号: 202110369998.2 申请日: 2021-04-07
公开(公告)号: CN113817745B 公开(公告)日: 2022-04-22
发明(设计)人: 万东石;牛智敏;刘建全;杨勇志;吴桂莉 申请(专利权)人: 兰州大学
主分类号: C12N15/29 分类号: C12N15/29;C12N15/84;C12N1/21;A01H5/00;A01H5/04;A01H6/00;C07K14/415;C12R1/01
代理公司: 北京力量专利代理事务所(特殊普通合伙) 11504 代理人: 戴治娟
地址: 730000 甘肃*** 国省代码: 甘肃;62
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摘要:
搜索关键词: 一种 促进 木材 形成 基因 orefla11 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种促进木材形成的基因OreFLA11,其特征在于:其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.含有权利要求1所述基因OreFLA11的表达载体。

3.如权利要求2所述的表达载体,其特征在于,所述的表达载体为双元农杆菌载体或可用于植物微弹轰击的载体。

4.如权利要求3所述的表达载体,其特征在于,所述的可用于植物微弹轰击的载体为pCXSN或pCXDG。

5.含有权利要求1所述基因OreFLA11的细胞系或宿主菌。

6.如权利要求1所述的基因OreFLA11在用于改善性状的木本植物育种中的应用,其特征在于,所述的改善性状选自以下一种或几种:

(1)提高木质素的含量;

(2)提高木糖的含量;

(3)提高阿拉伯糖的含量;

(4)降低纤维素含量;

(5)增厚木质部厚度;

(6)增厚木质部木纤维细胞次生壁厚度;

(7)增强植物茎秆的抗拉强度;

所述的木本植物为新疆杨。

7.一种由权利要求1所述的基因OreFLA11编码的蛋白质OreFLA11,其特征在于:其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。

8.构建含有权利要求2-4任一项所述基因OreFLA11的表达载体的方法,其特征在于,其步骤如下:

(1)将所述的基因片段通过酶切连接方法连接到表达载体上,转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中,经50 mg/L的卡那霉素筛选初步获得阳性克隆;

(2)进一步挑取单克隆通过PCR扩增,测序验证,最终得到融合OreFLA11基因的表达载体35S:: OreFLA11的阳性菌株;

(3)从步骤(2)获得的阳性菌株中提取连接成功的质粒,转化到感受态的农杆菌GV3101中,经50 mg/L的卡那霉素、50 mg/L利福平和50 mg/L庆大霉素初步筛选阳性克隆菌株;

(4)挑取步骤(3)得到的阳性单克隆菌株,通过PCR扩增,测序验证,最终得到转化成功的农杆菌GV3101阳性菌株,用于侵染新疆杨。

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