[发明专利]一种同时检测鱼肉中噻虫嗪和噻虫胺的方法

权利要求书

1.一种同时检测鱼肉中噻虫嗪和噻虫胺的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、从鱼肉中提取检测样品；

称取鱼肉样品2g，置于50mL离心管中，加入2mL 0.1％甲酸水和20mL提取液，涡旋1min，加入1g无水硫酸钠和2g无水硫酸镁，剧烈摇动30s，在4000rpm条件下离心5min，得到检测样品，所述提取液为乙腈、甲醇或乙酸乙酯中的一种；

S2、将检测样品进行净化处理；

将检测样品先经过HLB固相萃取小柱，然后在通过0.22μm有机针式滤器进行净化处理；

S3、绘制噻虫嗪标准溶液曲线、噻虫胺标准溶液曲线；

利用提取液配制不同浓度的噻虫嗪和噻虫胺混合标准溶液，进样并绘制噻虫嗪标准溶液曲线、噻虫胺标准溶液曲线；

S4、计算添加回收率；

设定噻虫嗪及其代谢物噻虫胺在鱼肉中添加浓度为0.01、0.1和10.0mg/kg时，进行添加回收率试验，分别得到噻虫嗪和噻虫胺的添加回收率和相对标准偏差(RSDs)

S5、检测；

根据噻虫嗪和噻虫胺在仪器上的响应，用噻虫胺和噻虫嗪标准曲线最低一档浓度乘以进样量作为噻虫胺和噻虫嗪的最小检出量；

S6|、分析

根据噻虫嗪和噻虫胺在超高效液相色谱串联质谱仪上的响应情况，以及鱼肉中噻虫嗪和噻虫胺最低添加浓度添加的样品在仪器上响应值均大于仪器的3倍信号噪音比，得出噻虫嗪和噻虫胺在鱼肉中的最低检测浓度；

步骤S5采用高效液相色谱串联质谱仪进行检测时，高相液相色谱中所采用的流动相A为0.1％甲酸水溶液；流动相B为乙腈；梯度洗脱程序为0min～0.5min，88％A；0.5min～3.5min，88％A～2％A；3.5min～4.0min，2％A；4.0min～4.1min，2％A～88％A；4.1min～6.0min，88％；流速为0.30mL/min；柱温为40℃，进样量为2.00μL；

步骤S5采用高效液相色谱串联质谱仪进行检测时，质谱条件为：

离子源：ESI⁺；

定量模式：MRM模式；

毛细管电压：5.5KV；

气帘气：35psi；

喷撞气：7psi；

喷雾气：50psi；

辅助加热气：50psi；

离子源温度：550℃；

射入电压：10V；

碰撞室射出电压：16V

噻虫胺定量离子对：250.0169.0，定性离子对：250.0132.0，碰撞能量(V)分别为18和25，去簇电压(V)为80；

噻虫嗪定量离子对：292.1211.1；定性离子对：292.1181.1，碰撞能量(V)分别为18和32，去簇电压(V)为80。

2.根据权利要求1所述同时检测鱼肉中噻虫嗪和噻虫胺的方法，其特征在于，所述提取液为乙腈。

3.根据权利要求1所述同时检测鱼肉中噻虫嗪和噻虫胺的方法，其特征在于，步骤S2所述HLB固相萃取小柱为Oasis PRiME HLB小柱。

4.根据权利要求1所述同时检测鱼肉中噻虫嗪和噻虫胺的方法，其特征在于，

噻虫嗪标准溶液曲线的回归方程为y＝37371563x+1463，其中R²＝1.0000；

噻虫胺标准溶液曲线的回归方程为y＝23227374x+4899，其中R²＝0.9999。