[发明专利]一种透明质酸的纯化方法

说明书

本发明提供了一种透明质酸钠的纯化方法，包括以下步骤：在低于45℃的温度下，调节透明质酸钠溶液的pH至碱性并保持，搅拌处理至微生物和内毒素含量达标，获得透明质酸钠溶液本发明的纯化方法通过在低温和碱性条件下，保持HA分子量的稳定、不降解，还去除细菌内毒素，杀灭和抑制微生物增长，无有毒有害抑制剂残留。采用的透明质酸的浓度较高，能够与现有浓缩工艺配套，不需要额外浓缩，节省成本。该方法能够有效降低微生物和内毒素含量，操作简便、成本低，适于工业化生产。

技术领域

本发明属于生物高分子制备领域，涉及一种不降低分子量的透明质酸纯化方法。

背景技术

商品透明质酸为其钠盐形式，即透明质酸钠(简称SH或HA)。它为白色纤维状或粉末状固体，有很强的吸湿性，溶于水，不溶于醇、酮、乙醚等有机溶剂。它的水溶液带负电，高浓度时有很高的粘弹性和渗透压。此外HA水溶液是一种非牛顿型流体，有着良好的粘弹性和流变形。基于HA特殊的性能，HA可以广泛的应用于医药、化妆品和保健食品当中。HA主要应用于临床治疗、诊断、化妆品基质以及营养保健品等方面。商品HA一般为其钠盐形式，其他金属盐如锌盐很少应用。

透明质酸钠具有多方面的药用价值，在制药产业中可以被用作有效成分和赋形剂。药用透明质酸钠的质量标准要求较高，对微生物、细菌内毒素含量有明确的要求。现有技术中，控制微生物和细菌内毒素的方法有的加入抑菌剂（如甲醛等），但是后期去除效果不佳，仍然有残留，对使用者会造成一定的影响；有的采用树脂吸附，但是由于透明质酸钠高浓度时的粘性，需要采用较稀的溶液才能进行吸附，后续浓缩繁琐、成本高，不适用于大规模生产，而且也容易进一步引入杂质。因此，需要开发一种简便的更安全的提纯HA的方法供大规模生产。

发明内容

针对目前透明质酸钠去除微生物、内毒素不彻底、成本高的问题，本发明提供一种透明质酸的纯化方法，通过控制温度采用碱处理，降低微生物和内毒素含量，方法简便、成本低，适于工业化生产。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

一种透明质酸钠的纯化方法，包括以下步骤：在低于45℃的温度下，调节透明质酸钠溶液的pH至碱性并保持，搅拌处理至微生物和内毒素含量达标，获得透明质酸钠溶液。

所述pH为9.0-12.0。

所述调节pH的试剂选自10%-30% NaOH溶液。

所述透明质酸钠溶液可以通过产业上常用的分离纯化、浓缩方法获得液体透明质酸钠产品。

所述透明质酸钠溶液还可以通过常规的分离纯化、干燥方法获得透明质酸钠粉末。

所述透明质酸钠溶液的浓度为0.3-1.0%（w/w）。

所述微生物和内毒素含量达标的标准为：微生物含量不大于10cfu/mL，内毒素含量不大于0.005IU/mL。

本发明具有以下优点：

透明质酸中的糖苷键很容易因为酸、碱或加热处理而断裂，导致较高分子量的HA在酸、碱、加热等条件下，可低分子化。本发明的纯化方法通过在低温和碱性条件下，保持HA分子量的稳定、不降解，还去除细菌内毒素，杀灭和抑制微生物增长，无有毒有害抑制剂残留，而且处理时间短。采用的透明质酸的浓度较高，能够与现有浓缩工艺配套，不需要额外浓缩，节省成本。该方法能够有效降低微生物和内毒素含量，操作简便、成本低，适于工业化生产。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步说明，但本发明不受下述实施例的限制。

实施例1 不同分子量透明质酸钠的纯化