[发明专利]对正丁醇特异性响应的BmoR蛋白突变体及其应用在审
| 申请号： | 202110361566.7 | 申请日： | 2021-04-02 |
| 公开（公告）号： | CN115160415A | 公开（公告）日： | 2022-10-11 |
| 发明（设计）人： | 霍毅欣;陈振娅;毋彤 | 申请（专利权）人： | 北京理工大学 |
| 主分类号： | C07K14/21 | 分类号： | C07K14/21;C12N15/31;G01N21/64;C12N15/70;C12N15/65;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 栗华楠 |
| 地址： | 100081 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 丁醇 特异性 响应 bmor 蛋白 突变体 及其 应用 | ||
1.一种BmoR突变体蛋白，其特征在于，所述突变体是在序列表SEQ ID NO.1所示的野生型BmoR蛋白的基础上，发生包含I183T和/或D273N的突变获得的。
2.如权利要求1所述的BmoR突变体蛋白，其特征在于，所述突变体蛋白具体为：
(1)序列表SEQ ID NO.3、5或7所示的氨基酸序列；或
(2)SEQ ID NO.3、5或7同源性75％以上的氨基酸序列；或
(3)在SEQ ID NO.3、5或7的基础上进行一个或多个氨基酸替换，和/或缺失，和/或添加后获得的具有SEQ ID NO.3、5或7相同功能的氨基酸序列。
3.权利要求1所述BmoR突变体在检测含有正丁醇的样品，或在筛选正丁醇生产菌株中的应用。
4.权利要求1所述BmoR突变体在构建检测正丁醇的生物传感器中的应用。
5.权利要求1所述BmoR突变体的编码基因。
6.如权利要求5所述的编码基因，其特征在于，如序列表SEQ ID NO.4、6或8所示。
7.包含权利要求5所述编码基因的重组质粒或重组菌株。
8.一种生物传感器，其特征在于，所述的传感器是包含权利要求5所述突变体编码基因、由BmoR突变体激活的启动子Pbmo、由Pbmo驱动的报告基因和表达BmoR突变体的启动子的表达元件。
9.如权利要求8所述的生物传感器，其特征在于，所述报告基因包括但不限于gfp、rfp、cfp、sfgfp、egfp、yfp、ecfp基因。
10.如权利要求8所述的生物传感器，其特征在于，表达BmoR突变体的启动子包括但不限于PbmoR、Ptac、PT7、PLlacO1。
11.如权利要求8所述的生物传感器，其特征在于，所述传感器是将由PbmoR启动的突变体编码基因连接至colE1复制起始位点、ampr和Pbmo启动的gfp基因所得。
12.如权利要求8所述的生物传感器，其特征在于，启动子Pbmo的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.10所示。
13.权利要求8所述生物传感器在检测含有正丁醇的环境、食品、医学、生物类样品，及筛选生产正丁醇的菌株中的应用。
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