[发明专利]一种水环境中微量雌激素类物质的检测方法

说明书

本发明提供了一种水环境中微量雌激素类物质的检测方法。该方法包括如下步骤：水样经玻璃纤维膜过滤去除不溶性悬浮颗粒，加入EDTA‑2Na溶解，加入雌激素内标混合储备液，并调节pH；经处理过的水样使用固相萃取富集目标雌激素，再在负压下用淋洗液淋洗固相萃取柱，在常压下用一定体积的洗脱溶剂洗脱目标物，收集洗脱液并进行氮吹，后定容，得到雌激素待测溶液；采用内标法，在高效液相色谱串联质谱仪上，定量检测水环境中富集到的雌激素类物质的含量。本发明检测方法采用固相萃取结合液相色谱串联质谱法，通过优化固相萃取条件，使所述检测方法能够快速、准确、高效地对自来水、地表水、畜禽养殖废水等多种水环境中的雌激素类物质进行检测，同时在各类水体中检测出雌激素类物质。

技术领域

本发明属于水环境中微量有机物分析与检测技术领域，尤其涉及一种水环境中微量雌激素类物质的检测方法。

背景技术

内分泌干扰物（EDCs）是一类干扰生物体内激素的合成、排泄以及活性的外源性物质。EDCs作为天然和人工合成的持久性化学物质包括农药、重金属和激素等。在激素中，雌激素由于其种类繁多、反应活性高、存在频率高以及在水体环境中存在一定的浓度而受到广泛的关注。根据其来源，雌激素可分为雌酚酮、17β-雌二醇、雌三醇等天然雌激素和炔雌醇、双烯雌酚等合成雌激素。此外，一些使用于塑料工厂的化学添加剂，例如双酚A，可以充当雌激素模拟物。

雌激素类物质被广泛地应用于人类和动物的治疗和作为畜禽的生长促进剂，最终又以尿液和粪便的形式被排放到自然水体中。传统的市政废水处理工艺不足以去除雌激素类物质，以致于在地表水中检测到ng/L-μg/L浓度级别的雌激素。长期接触即使是ng / L浓度级别的雌激素类物，会引起生物体生育机能下降，从而对周边生态环境系统以及人类健康造成重大威胁。对雌激素类物质的有效控制，一种具有高灵敏度的检测水环境中雌激素类物质分析方法的开发是前提。

目前，固相萃取-液相色谱串联质谱技术(SPE-LC-MS/MS)具有快速检测、较高的灵敏度和分离效率等优势，已被广泛用于测定环境样品中的痕量污染物。SPE具有快速方便的处理过程，能从各种样品中高效萃取多种有机化合物，因而，常作为提高检测灵敏度的重要前处理方法。

目前的分析方法中，大多数是在去离子水或具有简单或单一基质的环境样品下对雌激素类物质进行检测。然而，复杂的环境基质往往会对样品浓度测试结果产生较大偏差，进而导致检测方法的适用性变差。因此，亟需提供一种能够在多种水环境中准确并灵敏地检测雌激素类物质的方法。

发明内容

本发明目的旨在提供一种水环境中微量雌激素类物质的检测方法，采用固相萃取结合液相色谱串联质谱法，通过优化固相萃取条件，使所述检测方法能够快速准确高效地对多种水环境中的雌激素类物质进行检测。同时基于多种环境水质，使得此方法可获得准确而可靠的结果。

为了实现上述目的，本发明采取了以下技术方案。

本发明提供了一种水环境中微量雌激素类物质的检测方法，具体按如下步骤进行：（1）水样的预处理

水样经玻璃纤维膜过滤去除不溶性悬浮颗粒，加入EDTA-2Na溶解，加入雌激素内标混合储备液，并调节pH至9；

（2）固相萃取富集目标雌激素

依次用乙酸乙酯、甲醇和超纯水对固相萃取柱进行活化；将步骤（1）中处理过的水样经已活化的固相萃取柱富集；再在负压下用淋洗液淋洗固相萃取柱；并在常压下用一定体积的洗脱溶剂洗脱目标物，收集洗脱液并进行氮吹，后定容；过滤后置于进样瓶中，待测；

（3）采用高效液相色谱串联质谱法对水环境中雌激素类物质的含量检测

采用内标法，在高效液相色谱串联质谱仪上，定量检测经步骤（2）处理得到的进样瓶内的待测样品中从水环境中富集到的雌激素类物质的含量；所述的雌激素物质包括雌酚酮、17β雌二醇、雌三醇、炔雌醇、双烯雌酚和双酚A。