[发明专利]基于碳三氮五构建新型光致电化学生物传感器

权利要求书

1.一种光致电化学生物传感器的构建方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)在预处理后的玻碳电极表面滴加光电活性材料C₃N₅，继续通过电沉积组装金纳米颗粒，得到已修饰电极；

(2)通过Au-S键将双链DNA组装在步骤(1)中已修饰电极的界面上；

(3)用质量分数为0.5％到1％的巯基己醇封闭步骤(2)中产物的非特异性吸附位点，封闭40min以上然后用去离子水淌洗，即可得到光致电化学生物传感器；

步骤(1)中所述光电活性材料C₃N₅按照如下方法制备：

a、将经过煅烧后的三聚氰胺黄色粉末分散到去离子水中形成悬浮液，回流除去杂质，离心洗涤后在室温下干燥得到白色产物即为2,5,8-三氨基-s-庚嗪；

b、将步骤a中制备的2,5,8-三氨基-s-庚嗪分散到水合肼中，置于高压釜中密封，取出后在140℃下加热24h到36h，冷却得到淡黄色悬浮液；

c、用酸调节步骤b中所述淡黄色悬浮液的pH为1～2，过滤分别得到滤液和固体残渣；

d、再用碱将得到的滤液的pH调节为7.5～8.5后过滤得到固体I，得到的固体残渣先后先用酸溶解，再用碱调节pH为7.5～8.5后过滤得到固体Ⅱ；

e、将固体I和固体Ⅱ合并后反复进行以下步骤：先用酸溶解，再用碱调节pH为7.5～8.5后过滤；

f、将步骤e中过滤后得到的固体依次用去离子水和乙醇反复洗涤后真空干燥，然后以2℃/min到4℃/min的升温速率升温，保温2h即可得到黄色产物C₃N₅；

步骤(2)中所述双链DNA由底物链SP和TP杂交形成，所述底物链SP的5'和3'分别修饰敏化剂亚甲蓝和巯基，所述TP的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述底物链SP的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤a中所述煅烧为在425℃的温度下煅烧12h。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤b中所述水合肼的质量体积分数为55％，所述2,5,8-三氨基-s-庚嗪和水合肼的质量体积比为1.6:15，g:ml。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤c、步骤d和步骤e中所述酸为质量体积分数为10％的盐酸，碱为质量体积分数为10％的氢氧化钠溶液。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述光致电化学生物传感器的检测目标是MiRNA182-5p，所述MiRNA182-5p的核苷酸序列为SEQ ID NO.8所示。

6.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述玻碳电极的直径为4mm。