[发明专利]一种分离油菜籽中黑芥子酶的方法

权利要求书

1.一种分离油菜籽中黑芥子酶的方法，其特征在于：包括如下步骤：

取真空冷冻干燥后的菜籽，液氮研磨后过筛；

加入正己烷后超声处理，超声处理体系处于恒温环境中，处理完成后静置并弃掉上层液体；

将乙二胺四乙酸、二硫苏糖醇、聚乙烯吡咯烷酮的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液加入到超声处理弃掉液体的剩余固体中，超声提取再离心取上清液用纱布过滤；

过滤后的溶液加入硫酸铵粉末完全溶解后冰水浴1 h；

低温离心取沉淀部分加三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液复溶，转移至透析袋冰水浴透析直至透析液不含硫酸根离子；

在4℃下将透析袋埋入干燥的葡萄糖凝胶G15中，得到浓缩酶液；

所述菜籽研磨后过筛，研磨方式为液氮研磨；

所述超声处理中，超声处理混合液体中包括的菜籽与正己烷的质量比为1:4，超声处理重复4次；

所述干燥方式为真空冷冻干燥，所述真空冷冻干燥时间为48h；

所述过滤后的溶液加入硫酸铵粉末后完全溶解后冰水浴1h中，所述硫酸铵溶解后的质量分数为10~30%，使用的硫酸铵粉末浓度为12%；

所述超声处理中加入正己烷的混合溶液处于4℃恒温水浴中；

所述超声处理的设置为90W，30min；

所述液氮研磨后过筛，筛的目数为100目。