[发明专利]一种重组腺病毒表达载体及以其制备的多价诺如病毒疫苗

权利要求书

1.一种重组腺病毒表达载体，其特征在于：其为将多种不同亚型诺如病毒的VP1基因序列克隆到同一腺病毒载体中，获得同时表达多个亚型诺如病毒VP1蛋白的的重组腺病毒表达载体。

2.根据权利要求1所述的重组腺病毒表达载体，其特征在于：其为将GI.1VP1基因序列、GII.3VP1基因序列、GII.4VP1基因序列、GII.17VP1基因序列全部或部分克隆到同一腺病毒载体中，获得表达全部或部分GI.1VP1蛋白、GII.3VP1蛋白、GII.4VP1蛋白和GII.17VP1蛋白的重组腺病毒表达载体；

所述GI.1VP1蛋白的序列为序列表的序列2；

所述GII.3VP1蛋白的序列为序列表的序列3；

所述GII.4VP1蛋白的序列为序列表的序列4；

所述GII.17VP1蛋白的序列为序列表的序列5；

所述GI.1VP1基因序列的基因Bank收录号为KT943503.1；所述GII.3VP1基因序列的基因Bank收录号为KJ499444.1；所述GII.4VP1基因序列在基因Bank收录号为KC631827.1的基因序列的基础上，将编码其表达的蛋白序列第309位丝氨酸的密码子核苷酸AGC替换为天冬酰胺的密码子核苷酸AAC；所述GII.17VP1基因序列的基因Bank收录号为KP698928.1。

3.根据权利要求2所述的重组腺病毒表达载体，其特征在于：所述将GI.1VP1基因序列、GII.3VP1基因序列、GII.4VP1基因序列、GII.17VP1基因序列克隆到同一腺病毒载体中，按照如下任一方式进行：

1)将GI.1VP1基因序列、GII.3VP1基因序列、GII.4VP1基因序列、GII.17VP1基因序列两两连接得到两种蛋白的融合基因序列，再将两种融合基因序列先后克隆到同一腺病毒载体中；

2)将GI.1VP1基因序列、GII.3VP1基因序列、GII.4VP1基因序列、GII.17VP1基因序列中的任三种连接得到三种蛋白的融合基因序列，再将融合基因序列和余下的一种基因序列先后克隆到同一腺病毒载体中；

3)将GI.1VP1基因序列、GII.3VP1基因序列、GII.4VP1基因序列、GII.17VP1基因序列分别克隆到同一腺病毒载体中。

4.根据权利要求1-3任一所述的重组腺病毒表达载体，其特征在于：所述腺病毒载体为任一血清型腺病毒载体。

5.根据权利要求4所述的重组腺病毒表达载体，其特征在于：所述克隆到同一腺病毒载体中，连接位置为E1、E3、E4中的任一个或多个。

6.根据权利要求5所述的重组腺病毒表达载体，其特征在于：其为将GI.1VP1基因序列、GII.3VP1基因序列去除终止密码子后连接得到融合基因序列一，将GII.4VP1基因序列、GII.17VP1基因序列去除终止密码子后连接得到融合基因序列二；将融合基因序列一连接到AdC68XY4载体的E1区，将融合基因序列二连接到AdC68XY4载体的E3区，获得的表达GI.1VP1蛋白、GII.3VP1蛋白、GII.4VP1蛋白和GII.17VP1蛋白的重组腺病毒表达载体；

所述融合基因序列一为编码GI.1VP1蛋白和GII.3VP1蛋白的核苷酸序列；所述融合基因序列二为编码GII.4VP1蛋白和GII.17VP1蛋白的核苷酸序列。

7.一种重组腺病毒，利用权利要求1-6任一项所述的重组腺病毒表达载体包装得到。

8.一种多价诺如病毒疫苗，其特征在于：所述多价诺如病毒疫苗的活性成分为权利要求1-6任一项所述的重组腺病毒表达载体或权利要求7所述重组腺病毒。

9.制备权利要求8所述的多价诺如病毒疫苗的方法，其特征在于：包括将权利要求1-6任一项所述的重组腺病毒表达载体或权利要求7所述重组腺病毒作为活性成分，和佐剂以一定比例混合，得到的多价诺如病毒疫苗。

10.权利要求1-6任一项所述的重组腺病毒表达载体在制备治疗和/或预防诺如病毒所致疾病产品中的应用，

或，权利要求1-6任一项所述的重组腺病毒表达载体在制备诺如病毒抗血清中的应用，

或，权利要求7所述重组腺病毒在制备治疗和/或预防诺如病毒所致疾病产品中的应用，

或，权利要求7所述重组腺病毒在制备治疗和/或预防诺如病毒所致疾病产品中的应用。