[发明专利]通过引入系列不同同位素标签用于快速实时定量样品中目标分析物的检测方法

说明书

本发明提供了一种通过引入系列不同同位素标签用于快速实时定量样品中目标分析物的检测方法，以已知系列浓度的目标分析物分别连接不同的同位素衍生试剂a作为内标物，待测样品中的待测目标分析物连接同位素衍生试剂b，将所述内标物加入待测样品后进行质谱法分析，得到内标物的信号和待测目标分析物的信号，然后通过内标物的信号来计算得到待测目标分析物的浓度。本发明无需配制外标回归标准曲线，待测样品实时随行2个及以上内标参照或者内标标准标准曲线，实现了对基质的实时校正；通过采用系列不同同位素衍生试剂，在衍生试剂上加不同同位素来将不同同位素引入目标分析物中，解决了多个目标分析物测定时各目标分析物均需重标同位素内标的问题。

技术领域

本发明涉及检测分析技术领域，具体涉及一种用于快速实时定量样品中目标分析物的检测方法，尤其涉及一种通过引入系列不同同位素标签用于快速实时定量样品中目标分析物的检测方法。

背景技术

色谱质谱联用技术越来越多的应用于生物样品、环境样品、食品样品、合成样品、药物样品、化工样品、临床化学样品、法医样品、药理样品、农业样品等等。在目前的分析过程中里，通常使用外标标准曲线法，也有使用内标一点法的，外标标准曲线法最主要的缺点是只能在外部做校正，不能在样品内部做校正。内标一点法的主要缺点是只能用一点法做校正，不能用二点或者多点或者用内标标准曲线校正。

虽然以目前的分析方法和操作流程，也可以对待测样品进行比较准确的定量，但是一直存在以下这些问题，这些不足很大程度上限制了色谱质谱联用技术的快速分析、准确定量和更加广泛的应用。

以下列出了目前的分析流程和方法、存在的不足和限制。

1、样品在前处理过程中的提取效率、提取误差和进样误差，需要进行校正，这个目的可以通过随行内标校正化合物来实现，但是需要内标校正化合物和待测物性质尽可能一模一样的化合物，但是又不能对待测物在测定的时候造成干扰。这种随行内标校正化合物的方法，用于校正提取效率、提取误差和进样误差，在生物样品的测定中很常用，因为生物样品中的基质更加复杂，而且待测化合物的含量很低，在样品处理过程中带来的误差或者不同基质带来的误差会对待测化合物的准确测定产生很显著的影响；在生物样品的测定过程中，选择待测化合物的同位素作为随行的内标校正物是最常见的和行业推荐的方法。随行内标校正物的方法，提高了对检测的准确性控制，减少了因为操作带来的差异和结果的不稳定性，但是需要寻找合适的内标物，一般会选择待测化合物的类似物，但是在实践中我们发现，哪怕是类似物，其性质和待测化合物也有区别，目前最适合的是待测化合物的同位素内标，行业基本上默认待测化合物的同位素和待测化合物本身性质基本完全一致，但是同位素内标的合成困难，因为合成成本高所以购买价格很高，在对多个化合物同时测定时，就还需要每个化合物相应的同位素内标，这样成本就更高，而且即使购买了大量的同位素内标，也只能解决样品提取效率、提取误差和进样误差校正的问题，还是解决不了含量测定标物必须外标校正的问题。