[发明专利]一种甾体固醇类物质来源性检测方法及其应用在审
申请号: | 202110347345.4 | 申请日: | 2021-03-31 |
公开(公告)号: | CN114689734A | 公开(公告)日: | 2022-07-01 |
发明(设计)人: | 刘冰;卓悦;徐昕;陈佩杰 | 申请(专利权)人: | 上海体育学院 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/54;G01N30/60 |
代理公司: | 上海微策知识产权代理事务所(普通合伙) 31333 | 代理人: | 张静 |
地址: | 200082 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 固醇 物质 来源 检测 方法 及其 应用 | ||
1.一种甾体固醇类物质来源性检测方法,其特征在于,包括:提取样品中甾体固醇类物质后进行GC-C-IRMS检测分析δ13C值。
2.根据权利要求1所述甾体固醇类物质来源性检测方法,其特征在于,所述GC-C-IRMS检测分析过程包括:甾体固醇类物质分别进行气相色谱分析、升温燃烧程序以及同位素比质谱分析,其中气相色谱分析中色谱柱的升温程序包括:升温至150℃,保温1-5min;以30℃/min升温至200℃;接着以2.5℃/min升温至200-290℃,保温1-3min;然后以30℃/min升温至290-350℃,保温1-3min。
3.根据权利要求2所述甾体固醇类物质来源性检测方法,其特征在于,所述气相色谱分析中色谱柱的柱长为15-60m,内径为0.25-0.32mm,液膜厚度为0.15-0.25μm。
4.根据权利要求1-3任一项所述甾体固醇类物质来源性检测方法,其特征在于,所述提取样品中甾体固醇类物质过程包括:样品在缓冲液以及酶的作用下,于50-60℃酶解1-3h后,冷却,加入碱液以及萃取剂,震荡离心,取上清液,于65-75℃下N2吹干后加入高效液相色谱洗脱液进行HPLC分离纯化;之后在65-80℃N2吹干后,使用IRMS上机溶液进行溶解,即得。
5.根据权利要求4所述甾体固醇类物质来源性检测方法,其特征在于,所述缓冲液为磷酸二氢钠和磷酸氢二钠的混合溶液,所述磷酸盐缓冲液的pH为6-6.9。
6.根据权利要求5所述甾体固醇类物质来源性检测方法,其特征在于,所述碱液的浓度为15-25wt%。
7.根据权利要求6所述甾体固醇类物质来源性检测方法,其特征在于,所述碱液中溶质为碳酸钠和/或碳酸氢钠。
8.根据权利要求5-7任一项所述甾体固醇类物质来源性检测方法,其特征在于,所述IRMS上机溶液包括有机酯类和/或C4-C8烷烃。
9.根据权利要求8所述甾体固醇类物质来源性检测方法,其特征在于,所述萃取剂为重均分子量为70-100的有机醚类溶剂。
10.一种根据权利要求1-9任一项所述甾体固醇类物质来源性检测方法在检测尿液中兴奋剂中的应用。
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