[发明专利]一种抗过敏的婴儿双歧杆菌制剂及其制备方法有效
申请号: | 202110347183.4 | 申请日: | 2021-03-31 |
公开(公告)号: | CN114317310B | 公开(公告)日: | 2023-09-22 |
发明(设计)人: | 陈大伟;童颖佳;童群义;陈金林;吉峰 | 申请(专利权)人: | 江苏蓝泽生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A61K35/745;A61P37/08;C12R1/01 |
代理公司: | 北京牛思巴巴知识产权代理有限公司 16203 | 代理人: | 陈义 |
地址: | 224300 江苏省盐城市射*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 过敏 婴儿 杆菌 制剂 及其 制备 方法 | ||
1.一种婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)菌株,其特征在于,所述的婴儿双歧杆菌菌株为婴儿双歧杆菌Miuyo-21菌株,保藏编号为CGMCC 20868;
所述婴儿双岐杆菌菌株通过以下步骤培养分离得到:
取婴儿粪便样品5-10g,置于无菌的50ml离心管中,加入20ml无菌生理盐水,振荡混匀后置于37℃厌氧培养箱中,静置培养过夜,吸取1ml样液,以无菌生理盐水依次进行10倍梯度稀释至10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6,每个梯度分别取100μl菌悬液涂布于改良MRS平板上,放置于37℃厌氧培养箱中倒置培养,24h后,从不同梯度的涂布的培养平板中挑选菌落转接培养,在此基础上,挑取符合婴儿双歧杆菌典型特征的菌落在改良MRS平板上进行反复划线培养分离,挑取符合双歧杆菌菌落生长形态的单菌落接入改良MRS液态培养基中,于37℃厌氧培养箱中培养,最后获得一株具有良好生长性能的菌株;
所述改良MRS液态培养基为:葡萄糖20g/L、蛋白胨10g/L、牛肉浸膏10g/L、酵母浸膏5g/L、琼脂15g/L、K2HP04 2g/L、柠檬酸氢二铵2g/L、乙酸钠5g/L、Tween-80 1g/L、MgS04.7H200.5g/L、MnS04.4H20 0.05g/L、L-半胱氨酸盐酸盐0.5g/L。
2.权利要求1所述的婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)菌株在制备抗过敏的药物中的应用。
3.一种抗过敏的制剂,其特征在于,所述制剂包含权利要求1所述的婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)菌株。
4.权利要求3所述抗过敏的制剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将婴儿双歧杆菌Miuyo-21菌株活化后,于液体培养基中进行逐级扩大培养,得到液体培养产物;
(2)将所述液体培养产物进行固液分离并除去液体部分,得到婴儿双歧杆菌湿菌体;
(3)将所述婴儿双歧杆菌湿菌体接种至固体发酵培养基中进行培养,经低温干燥、粉碎、造粒、包衣,即得所述抗过敏的制剂。
5.根据权利要求4所述抗过敏的制剂的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,将婴儿双歧杆菌经斜面培养或平板培养活化后接种至三角瓶液体培养基中,37℃、厌氧条件下培养24h,得到三角瓶液体菌种;将所述三角瓶液体菌种接种至发酵罐液体培养基中进行培养,37℃、厌氧条件下培养24h,得到液体培养产物;
所述斜面培养或平板培养的培养基包含如下浓度的原料组分:葡萄糖20g/L、蛋白胨10g/L、牛肉浸膏10g/L、酵母浸膏5g/L、琼脂15g/L、K2HP04 2g/L、柠檬酸氢二铵2g/L、乙酸钠5g/L、Tween-80 1g/L、MgS04.7H20 0.5g/L、MnS04.4H20 0.05g/L、L-半胱氨酸盐酸盐0.5g/L;
所述三角瓶液体培养基和发酵罐液体培养基均包含如下浓度的原料组分:葡萄糖粉20g/L、蛋白胨粉10g/L、牛肉浸膏10g/L、酵母浸膏5g/L、番茄酱10g/L、K2HP04 2g/L、柠檬酸氢二铵2g/L、乙酸钠5g/L,Tween-80 1g/L、MgS04.7H20 0.5g/L、MnS04.4H20 0.05g/L、L-半胱氨酸盐酸盐0.5g/L。
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