[发明专利]同时测定苗药隔山消中8个指标成分的含量的方法

说明书

本发明公开了一种同时测定苗药隔山消中8个指标成分的含量的方法，该方法通过建立超高效液相色谱‑串联质谱UPLC‑ESI‑MS法同时测定苗药隔山消中告达亭、松脂素、白首乌二苯酮、阿魏酸、没食子酸、东莨菪内酯、丁香酸、绿原酸8个指标成分的含量；采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱，2.1 mm×100 mm，1.7µm，以0.1%甲酸水溶液‑0.1%甲酸乙腈溶液为流动相，梯度洗脱，流速0.35 mL/min，柱温40℃，采用电喷雾离子源ESI，多反应离子监测MRM模式检测。本发明方法简单、快捷，灵敏度高，专属性好，可为隔山消药材的质量控制提供参考依据。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体地说是涉及一种UPLC-ESI-MS法同时测定苗药隔山消中8个指标成分的含量的方法。

背景技术

隔山消又名飞来鹤、过山消、白首乌等，为萝藦科白前属植物耳叶牛皮消Cynanchum auriculatum Royle ex Wight的干燥块根，主要产于湖南、湖北，四川等地，为云贵地区少数民族常用的药材，民间以块根入药，在我国已有悠久的药用历史，始载于宋朝《开宝本草》，现收载于《贵州省中药材、民族药材质量标准》(2003年版)。现代研究表明隔山消中主要含有苯乙酮类、甾体苷类、有机酸类、香豆素类、木脂素类等多种化学成分，具有促进胃肠道运动的作用、免疫调节作用、抗肿瘤作用、抗衰老作用、保肝等作用。

《贵州省中药材、民族药材质量标准》(2003年版)隔山消质量标准中仅收载了其性状、鉴别、薄层色谱鉴别、性味、功能主治、用法用量及储藏条件等进行了描述，而对其成分的含量测定鲜见报道。目前隔山消的研究主要集中在化学成分的分析与分离提取上，曹雨等应用UPLC-Q-Exactive技术快速归属和鉴定隔山消抗神经氨酸酶最佳活性部位中的化学成分，谢凯强利用HPLC和H-NMR对隔山牛皮消、耳叶牛皮消和戟叶牛皮消三种民间称之为“隔山消”的植物中C₂₁-甾体苷元类化学成分进行分析并建立了指纹图谱，而对于其化学成分的含量测定报告较少、方法单一且耗时长，孙佳等采用HPLC同时测定隔山消中5个成分的含量，肖培云等采用HPLC法测定隔山消中没食子酸的含量。而中药的化学成分具有复杂性与多样性的特点，同时也是其发挥疗效的物质基础，在中药内有效成分尚不明确的情况下若只采用一个或几个少数指标进行质量的评价，则不能全面真实反映药材的质量状况。

发明内容

本发明的目的在于为完善隔山消质量标准，提供一种UPLC-ESI-MS法同时测定苗药隔山消中8个指标成分的含量的方法，以期进一步为隔山消的质量控制提供实验依据。

本发明是这样实现的：

一种同时测定苗药隔山消中8个指标成分的含量的方法，该方法通过建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-ESI-MS)法同时测定苗药隔山消中告达亭、松脂素、白首乌二苯酮、阿魏酸、没食子酸、东莨菪内酯、丁香酸、绿原酸8个指标成分的含量；采用ACQUITY UPLCBEH C₁₈色谱柱(2.1mm×100mm，1.7μm)，以0.1％甲酸水溶液-0.1％甲酸乙腈溶液为流动相，梯度洗脱，流速0.35mL/min，柱温40℃，采用电喷雾离子源(ESI)，多反应离子监测(MRM)模式检测。

其中，该方法采用ACQUITY系统超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱仪，包括二元梯度泵、自动进样器、柱温箱、三重四级杆质量分析器和Masslynx4.1质谱工作站，Allegra 64R型低温高速离心机，ZH-2型涡旋混合器，AE240型十万分之一电子天平，FL-UP-YZ-20型超纯水仪，KQ-250E型超声波清洗器。