[发明专利]与芽孢杆菌属近缘的厚壁菌门细菌菌株及其抗癌应用在审

专利信息
申请号: 202110305514.8 申请日: 2021-03-25
公开(公告)号: CN112852682A 公开(公告)日: 2021-05-28
发明(设计)人: 刘树林 申请(专利权)人: 刘树林
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;A61K35/74;A61P35/00;C12R1/01
代理公司: 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 代理人: 何志欣
地址: 150081 黑龙*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要:
搜索关键词: 芽孢 杆菌 近缘 厚壁菌门 细菌 菌株 及其 抗癌 应用
【权利要求书】:

1.一种与芽孢杆菌属近缘的厚壁菌门细菌(Phylum:Firmicutes)菌株,其特征在于,所述菌株的保藏编号为CGMCC No.17886。

2.一种与芽孢杆菌属近缘的厚壁菌门细菌(Phylum:Firmicutes)菌株,其特征在于,革兰氏染色呈阳性,需氧或兼性厌氧,有荚膜,芽孢椭圆、卵圆、柱状或圆形;与GenBank中已发表细菌序列进行比较,其全基因组序列与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的基因组序列一致性最高,但有明显差异,包含SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的两个特征性序列。

3.由权利要求1或2所述菌株产生的代谢产物。

4.一种抗癌细菌制剂,其特征在于,所述制剂权利要求1或2所述的菌株经扩大培养而得。

5.根据权利要求4所述的细菌制剂,其特征在于,是

(i).所述菌株的固体培养物或液体培养物;

(ii).(i)中的液体培养物经过固液分离得到的液体部分;或

(iii).(ii)中的所述液体部分经过进一步提纯得到的产物。

6.根据权利要求4或5所述的细菌制剂,其特征在于,所述培养基是淀粉培养基;优选地,所述淀粉培养基中所采用的淀粉来自谷物,或选自由马铃薯、玉蜀黍、大豆和小米组成的组的一种或多种。

7.权利要求3所述的代谢产物或权利要求4-6任一所述的细菌制剂的制备方法,其特征在于,包括将所述菌株接种至培养基中,在14℃至39℃环境下扩大培养。

8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,所述培养基是液体培养基,包括以下步骤:

(1)将所述菌株接种至液体培养基中,并以100至150转/分钟,优选120转/分钟的速度在14℃至39℃,例如15℃、20℃、25℃、30℃或35℃,培养2天至10天,优选5至8天,获得培养菌液;

(2)对所述培养菌液进行固液分离,取上清;

优选所述固液分离采用离心方式进行,优选的是,所述离心的离心速度为8000rpm,离心时间为10分钟。

9.根据权利要求7或8所述的制备方法,其特征在于,包括如下步骤

(1)从经过平板培养的培养基上取单菌落到5mL GRC001液体培养基中,120转/分钟,14℃至39℃,扩增2天至10天后,得到待扩大培养菌液;

(2)将5mL待扩大培养菌液菌液转移至100mL GRC001液体培养基中,120转/分钟,14℃至39℃,扩增2天至10天,得到扩大培养菌液;

(3)将扩大培养菌液8000rpm,离心10min,取上清液。

10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,所述液体培养基为GRC001液体培养基,配方如下:淀粉20重量份,KNO3 1重量份,K2HPO4 0.5重量份,MgSO4·7H2O 0.5重量份,NaCl 0.5重量份,FeSO4·7H2O 0.01重量份,重铬酸钾0.05重量份;

优选所述淀粉来自谷物,或来自由马铃薯、玉蜀黍、大豆和小米组成的组的一种或多种。

11.一种抗癌药物,其特征在于,所述抗癌药物的活性成分包含权利要求3所述的代谢产物,或权利要求4至6中任一项所述的细菌制剂。

12.权利要求1或2所述的菌株、权利要求3所述的代谢产物、权利要求4至6中任一项所述的细菌制剂、权利要求11所述的药物在抗癌中的应用。

13.根据权利要求12所述的应用,其特征在于,所述癌指肺癌、肝癌、乳腺癌、子宫颈癌、卵巢癌、结直肠癌或白血病,优选为卵巢癌。

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