[发明专利]一种山羊源牛疱疹病毒1型毒株及其应用

说明书

本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及一种山羊源牛疱疹病毒1型毒株BoHV‑1/Goat/CHN/HB01/2016。该毒株分离自腹泻山羊的粪便，在体外MDBK细胞中，通过病毒毒价、一步生长曲线、噬斑大小等结果，证明该毒株的复制能力减弱。病毒的基因组全长133,971bp，GC含量高达71％，通过gC片段的比对分析，该病毒属于BoHV‑1.1亚型，其中在gB、gK、gM、VP8蛋白中存在特异性突变，可能与毒株的致病力相关。该毒株攻毒牛后，通过临床症状评分、鼻腔排毒和肺脏组织病理变化，表明毒株致病力减弱。本发明为研究BoHV‑1的致病力和跨物种传播机制奠定重要基础，同时也为临床上的疫苗研制提供了重要材料。

技术领域

本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及一种山羊源牛疱疹病毒1型毒株。

背景技术

牛疱疹病毒1型(Bovine herpesvirus-1，BoHV-1)属于疱疹病毒科(Herpesviridae)α-疱疹病毒亚科(Alphaherpesvirinae)水痘病毒属(Varicellovirus)，也称为牛传染性鼻气管炎病毒(Infection bovine rhinotracheitis virus,IBRV)。BoHV-1是牛传染性鼻气管炎病的病原，能引起牛发生一种急性、热性、接触性传染病，主要临床表现为上呼吸道及气管炎、黏膜炎、高热、流鼻汁、呼吸困难、流产等。BoHV-1感染后可引起机体免疫抑制，继发细菌或其他病毒感染，造成严重的肺炎，称为牛呼吸道疾病综合征(Bovine respiratory disease complex，BRDC)，又称“运输热”，给世界养牛业造成了巨大损失。

BoHV-1主要感染牛和水牛，也有血清学证据表明感染其他偶蹄动物。在土耳其山羊群中BoHV-1的中和抗体阳性率为20.9％；在伊朗绵羊中和抗体阳性率为10.7％-28.4％；埃及绵羊和山羊BoHV-1感染的血清阳性率分别为23.8％和27.6％；在加拿大，绵羊BoHV-1的中和抗体阳性率为10.8％；在韩国中和试验确定山羊中BoHV-1血清阳性率为13.7％。研究表明：相比于绵羊，山羊和牛之间的感染存在显着相关性，因此可将山羊视为BoHV-1的潜在贮藏宿主。病毒宿主的多样性对控制和预防该病增加了难度，目前很少有关于山羊源BoHV-1毒株的分离和鉴定，这极大限制了BoHV-1在山羊与牛之间跨物种传播机制的研究。本发明人通过病毒的分离鉴定，首次从腹泻山羊粪便中获得一株山羊源BoHV-1，体内和体外均验证该病毒毒力天然减弱，这为研究BoHV-1的致病和跨物种传播机理以及疫苗的研制提供了一种良好的天然材料。

发明内容

本发明的目的在于提供一种山羊源牛疱疹病毒1型(Bovine herpesvirus-1，BoHV-1)毒株，该毒株不仅可作为BoHV-1致病和跨物种传播机理研究的对象，同时也能作为疫苗研制更好的材料，对牛疱疹病毒的防控具有重要的意义。

本发明的技术方案如下所述：

申请人于2016年5月从湖北省黄冈市某山羊养殖场，从腹泻山羊的粪便中分离鉴定及纯化，得到一株BoHV-1毒株，申请人将其命名为牛疱疹病毒1BoHV-1/Goat/CHN/HB01/2016，于2020年12月11日保藏于湖北省武汉市武汉大学的中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO：V202092。

在体外MDBK细胞中，通过病毒空斑、一步生长曲线、病毒毒价等结果，证明该毒株的复制能力低于参考毒株BoHV-1 Cooper。

提取病毒的全基因组进行高通量测序，获得一条完整的病毒基因组序列，基因组全长133,971bp，GC含量高达71％。通过gC片段的比对分析，该病毒属于BoHV-1.1亚型。与参考毒株Cooper比较，该毒株在gB、gK、gM、VP8蛋白中存在特异性突变，这些突变可能与毒株的致病力相关。

攻毒牛后，通过临床症状评分、鼻腔排毒和肺脏组织病理变化，表明本发明毒株致病力低于参考毒株Cooper。

本发明具有以下优点：