[发明专利]具有抑制细丽外担菌活性作用的贝莱斯芽孢杆菌JXJ b01及其应用

说明书

本发明涉及微生物应用技术领域，具体涉及一种具有抑制细丽外担菌活性作用的贝莱斯芽孢杆菌JXJ b01及其应用，在新型生物农药方面的应用，该菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC No.21562，该菌对油茶叶肿病的病原菌细丽外担菌具有很好的抑制作用，在农作物真菌性病害中具有良好的应用前景，可用于各种农作物真菌性病害的生物防治。

技术领域

本发明涉及微生物应用技术领域，具体涉及一种分离自油茶种子的贝莱斯芽孢杆菌JXJ b01及其应用。

背景技术

油茶泛指山茶属中具有生产价值的油用物种，在世界上分布不广，我国是其自然分布的中心地区，油茶产量占世界95%以上。茶油有“东方橄榄油”之美誉。近年来，随着生活水平的提高，茶油越来越受到人们的青睐，我国油茶林面积也因此迅速增加，2019年已达6700多万亩，2025年将达到9000万亩。

据调查，油茶病害有50多种，其中油茶叶肿病分布广、发生普遍、危害严重，其病因是细丽外担菌（ Exobasidium gracile）感染油茶幼果嫩叶，导致感染组织肿大、变形、肉质化，产生茶苞茶耳，病株率高达40%-96%，严重影响油茶生长，使油茶果减产20%-41.9%，严重病株果实损失可超过90%。

目前油茶叶肿病主要靠人工清除病叶防治，效率低，劳动强度大；另外，波尔多液和敌克松液等农药也是其常用防治剂，但长期使用波尔多液等农药会导致重金属铜和农药等污染土壤，并影响茶油品质。因此，随着我国油茶产业的迅猛发展，研制高效、环保新型油茶叶肿病防治剂具有重要的意义。

发明内容

本发明为解决上述中的技术问题，提供一种能够高效抑制细丽外担菌的贝莱斯芽孢杆菌，从而有效防治油茶叶肿病、茶饼病等的发生，提高油茶产量和品质，降低油茶生产成本。

本发明的是通过以下技术方案实现的：

具有抑制细丽外担菌活性作用的贝莱斯芽孢杆菌JXJ b01，分离自油茶种子，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC No.21562，保藏日期为2020年12月28日。保藏机构地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编：100101，电话：86-10-64807355。

本发明涉及的细菌JXJ b01，经16S rRNA基因序列（1539 bp）分析和同源性比较，确定其为芽孢杆菌属的微生物，命名为贝莱斯芽孢杆菌JXJ b01，其16S rRNA基因在GenBank中的登录号是MW259979。菌株JXJ b05细胞大小为0.5-1.0 × 1.0-1.5 μm，芽孢中生，在各种微生物培养基上均生长良好。

本发明提供对昆明小鼠无毒的贝莱斯芽孢杆菌JXJ b01，将菌株采用细菌培养基培养48 h后，将培养液离心，分别收集上清液和菌体或芽孢沉淀，并以上清液和菌体或芽孢沉淀分别饲喂小鼠2周，小鼠生长正常，且小鼠粪便中检测到该菌芽孢，说明该菌及其代谢产物对小鼠等动物没有致病性或毒性。

本发明还提供贝莱斯芽孢杆菌JXJ b01生物防治剂的2种制备方法。

方法一：配制微生物培养基，或采用食品加工厂等废水，补充适量的碳氮源后，调pH值至7.0-7.5，121℃高压蒸汽灭菌30 min，冷却至30-45℃后接入该菌，进行通气搅拌培养2-6 d，即得到细菌细胞或芽孢密度为10⁸~10⁹ CFU/ml的液体制剂，该液体制剂可以直接用水稀释并喷于油茶林，该菌即可以在油茶林的土壤中生长，也可在油茶植株上定殖，从而有效抑制油茶叶肿病的发生。