[发明专利]一种外泌体冻干粉、其制备方法及护肤品

说明书

本发明公开了一种外泌体冻干粉、其制备方法及护肤品，其中外泌体冻干粉由如下重量百分比的原料制成：脐带间充质干细胞外泌体40‑80％；甘露醇10‑30％；海藻糖10‑30％；透明质酸钠、寡肽‑1和寡肽‑3余量。制备方法是将外泌体冻干粉原料配制成溶液，然后将溶液在‑80℃以下预冻12‑15h后，置于真置于真空度为80mT的冻干机中，在‑50℃以下冷冻干燥26‑32h后得到。护肤品含有该外泌体冻干粉。该外泌体冻干粉能够在低温下运输，2‑8℃下可保存至少12个月，使用时使用溶媒溶解外泌体即可使用。

技术领域

本发明涉及干细胞加工及应用领域，具体涉及一种外泌体冻干粉、其制备方法及护肤品。

背景技术

皮肤是一个复杂的器官，具有重要的身体屏障功能，且很容易受到各种各样的伤害。皮肤的衰老主要有两大诱因：一是随着年龄增长所导致的内源性自然衰老；二是以紫外线伤害带来的光老化为主的各种外源性衰老，这些外源性衰老并不与年龄成正比。

人体表皮层厚度为50-120微米，表皮-真皮厚度为2-5毫米。人真皮成纤维细胞(HDFs)是皮肤真皮层中的主细胞群，它们的健康和活性关乎着皮肤健康和美丽。不管是内源性(如年龄增长)和外源性(如紫外线、不良饮食作息和情绪压力等)的诱因不仅会让成纤维细胞失去活性，逐渐老化，数量减少，导致皮肤胶原合成减少；还会通过基质降解金属蛋白酶(MMPs)加速真皮基质降解，逐渐失去产生胶原蛋白和更新细胞间基质的能力。

人的肌肤在年轻时，肌肤光滑饱满，吹弹可破，这是由于我们的肌肤细胞在我们年轻时能够不断进行细胞分裂并分泌出大量的细胞外基质帮助完成肌肤细胞的更新，但是随着年龄的增加，我们肌肤细胞分裂再生与分泌能力减弱，肌肤中细胞老化同时细胞基质逐渐减少。至此肌肤细胞再生能力减弱，衰老细胞不能及时被新生细胞所取代，肌肤衰老从细胞组织学的角度开始出来，一些衰老问题，包括小细纹、色斑、肤色暗沉问题接踵而来。因此，在人体肌肤还未出现严重的衰老症状之前，使用含有干细胞外泌体的护肤品干预人体肌肤衰老来是一种十分重要的手段。细胞外泌体是细胞在生理活动过程中分泌出来的生理活性物质，主要功效成分包括蛋白质类物质及micRNA类核酸物质。外泌体对皮肤有如下作用，最终全面改善皮肤状态。1.促进基地细胞再生、修复；2.促进血管再生和修复；3.促进胶原蛋白分泌、重组。

目前市场有的外泌体冻干粉产品多采用脂肪间充质干细胞分泌的外泌体提取冻干而来。通常情况下，未经处理的外泌体放置在4℃环境下，其结构形态只能维持10天左右，所以需要在-80℃的条件下才能实现长期保存，但-80℃的保存条件需要昂贵的设备，且占用较大的空间，不方便运输，所以-80℃不是完美的外泌体长期保存的方法。

发明内容

有鉴于此，为解决上述技术问题，本发明的目的在于提出一种外泌体冻干粉、其制备方法及护肤品，该冻干粉能够在低温下运输，2-8℃下可保存至少12个月，使用时使用溶媒溶解外泌体即可使用。

所采用的技术方案为：

第一方面，本发明提供一种外泌体冻干粉，其由如下重量百分比的原料制成：

脐带间充质干细胞外泌体 40-80％；

甘露醇 10-30％；

海藻糖 10-30％；

透明质酸钠、寡肽-1和寡肽-3余量。

进一步地，脐带间充质干细胞外泌体的含量为60-70％。

进一步地，甘露醇的含量为10-20％。

进一步地，海藻糖的含量为10-20％。

进一步地，脐带间充质干细胞外泌体采用如下方法制备：首先采用胶原酶-胰酶消化法培养脐带间充质干细胞，然后再进行脐带间充质干细胞外泌体的提取和纯化。